摘要:本文以瑞香狼毒不定芽為材料,研究了在250 mL培養瓶懸浮培養過程中,影響其生長及活性物質(傘形花內酯、東莨菪內酯、總黃酮)積累的四類因子(蔗糖濃度、培養基強度、接種量、接種長度),初步建立了不定芽的懸浮培養體系。在此基礎上,研究了3 L生物反應器內,影響不定芽生長及活性物質積累的因素(蔗糖濃度、6-BA濃度、初始接種量)。結果顯示,不定芽在250 mL培養瓶中懸浮培養周期是15 d,最佳蔗糖濃度、培養基強度、接種量、接種長度分別是30 g·L^-1、MS培養基、1.0 g、3 cm。在此培養條件下,不定芽中傘形花內酯、東莨菪內酯和黃酮累積量都在15 d達到最大值,分別為0.351、0.035和2.459 mg。3 L生物反應器內不定芽懸浮培養周期為24 d,最佳培養條件為蔗糖30 g·L^-1、6-BA 0.5 mg·L^-1和初始接種量15 g。此條件下,傘形花內酯、東莨菪內酯和黃酮累積量分別為6.041、0.763和51.334 mg。本研究建立了瑞香狼毒不定芽的小型生物反應器培養體系,為進一步大規模培養,高效生產上述三種活性物質奠定了基礎。
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