摘要:目的探討缺氧/復氧(H/R)誘導的分化后腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(PC12)凋亡與哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/核糖體蛋白S6激酶(p70S6K)通路的關系。方法實驗分為正常對照(Con)組、H/R組、H/R+N-乙酰半胱氨酸(NAC)組、H/R+雷帕霉素(Rapa)組、NAC組及Rapa組。應用MTT法檢測細胞活性,Hoechst 33342染色檢測細胞凋亡率,用活性氧試劑盒檢測細胞內活性氧(ROS)生成,Western blot檢測Bax、Bcl-2、p-mTOR(Ser2448)及p-p70S6K(Thr389)的表達。結果H/R誘導分化后PC12神經細胞凋亡,Bax表達增加,Bcl-2表達降低,NAC或Rapa顯著抑制H/R所致的細胞凋亡,逆轉Bax及Bcl-2表達的變化;H/R增加分化后PC12神經細胞內ROS水平,NAC顯著抑制H/R所致細胞內ROS水平的增加,而Rapa對細胞內ROS水平無明顯影響;H/R增加分化后PC12神經細胞p-mTOR(Ser2448)及p-p70S6K(Thr389)的表達,NAC或Rapa顯著抑制H/R所致細胞p-mTOR(Ser2448)及p-p70S6K(Thr389)表達的增加。結論H/R可能通過升高細胞內ROS水平,進而激活mTOR/p70S6K信號通路,誘導分化后PC12神經細胞凋亡。
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