摘要:目的以透明質酸(HA)修飾基因載體殼聚糖(CS)納米微球,制作一種新型的HA/CS/pDNA基因轉染系統,觀察其結構特征及體外對軟骨細胞的轉染能力。方法將不同比例的HA和CS與負載增強型綠色熒光蛋白基因(EGFP)的質粒DNA(pDNA)以復凝聚法制成納米微球,以掃描電鏡檢測納米微球形態,Zeta電位粒度分析儀測定其粒徑、表面電位;凝膠電泳阻滯實驗觀察CS和pDNA的結合力;體外轉染兔關節軟骨細胞,以流式細胞儀及熒光顯微鏡檢測轉染效率。結果HA/CS/pDNA納米微球多呈球形,粒徑為(223±51)mm,表面Zeta電位為(17.4±6.1)mV,可有效保護pDNA免受DNaseⅠ的降解。體外轉染實驗證明HA/CS/pDNA納米微球能介導pEGFP轉染軟骨細胞并在細胞內表達綠色熒光蛋白,轉染率達(15.450±0.404)%,比裸pDNA組和CS/pDNA組有更高的轉染效率(P〈0.05)。結論復凝聚法制備的HA/CS/pDNA納米微球是一種有效的新型非病毒基因轉染系統,對軟骨細胞有著潛在的靶向基因轉染能力。
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