摘要：為建立以紅色聚苯乙烯納米微球為載體的犬細小病毒(CPV)抗體檢測的間接凝集方法,本研究表達純化了CPV-2VP2截短的重組蛋白rsVP2,并以rsVP2為致敏原與納米微球偶聯制備了免疫彩色納米微球;通過對反應條件的優化,建立了一種快速檢測CPV-2抗體的間接凝集方法。特異性試驗結果顯示,致敏微球僅與CPV-2陽性血清發生凝集反應,不與犬瘟熱病毒、狂犬病病毒和犬腺病毒的陽性血清發生凝聚反應,特異性強;該凝集方法檢測血清中和抗體的最低效價為1∶256;同一批次制備的3份致敏微球、3個不同批次制備的致敏微球以及4℃保存90d的致敏微球與CPV-2陽性血清的凝集反應特異性一致,凝集程度無明顯差異,重復性穩定性均較好。該間接凝集檢測方法對40份血清樣品的檢測結果與ImmunoComb■ Canine VacciCheck試劑盒(Dot-ELISA)檢測結果的陽性符合率為97%。本研究建立的間接凝集方法為幼犬CPV-2母源抗體或免疫犬CPV-2抗體檢測提供了一種快速、簡便、準確、經濟的方法。