摘要：為建立一種基于TaqMan探針法定量檢測霍亂弧菌的三重熒光定量PCR方法,以霍亂弧菌種特異性基因ompW和毒力基因ctx、hly為靶基因,分別設計特異性引物及相應的TaqMan探針。在ompW、ctx、hly探針的5’端分別標記CY5、FAM、HEX熒光報告基團,3’端均標記BHQ1熒光淬滅基團。結果顯示,本試驗建立的三重熒光定量PCR方法與其他菌株無交叉反應,其最低檢出限達到了10 CFU/m L,重復性試驗中每組變異系數均小于1.4%;檢測人工染菌的蝦肉和貝類樣品時,最低檢出限也達到1×102CFU/m L。結果表明,本實驗室建立的三重熒光PCR檢測方法具有靈敏度高、特異性強和重復性好的特點,是高通量檢測致病性霍亂弧菌的有效手段。