摘要:為獲得適用于研究擬穴青蟹(Scylla paramamosain)不同發育時期胚胎基因表達的內參基因,本研究采用 3 個內參基因篩選軟件 geNorm、NormFinder 及 BestKeeper 對微管蛋白α1A(Tuba1a)、核糖體蛋白 L13(Rpl13)、泛素(UBQ)、核糖體蛋白 S6 激酶(Rps6)、精氨酸激酶(Ak)、3-磷酸甘油脫氫酶(gapdh)、28S 核糖體 RNA(28S)、18S 核糖體 RNA(18S)和延伸因子 1A基因(EF-1α)等 9個常用候選內參基因在擬穴青蟹不同發育時期胚胎的表達穩定性進行分析。geNorm 分析表明, EF-1α和 Rpl13 的表達穩定性最高,并且采用 2 個內參基因同時校正目標基因的定量結果可以達到最優效果;NormFinder分析表明, gapdh和 EF-1α是 9個候選內參基因中表達最穩定的;BestKeeper分析表明, gapdh 的標準偏差和變異系數是 9 個候選基因中最低的。綜合 3 個內參基因篩選軟件,可以選用 EF-1α,或選用 EF-1α和 gapdh 雙內參同時校正擬穴青蟹不同胚胎發育時期各基因的表達情況。
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