摘要：目的探索乙型腦炎疫苗株包膜蛋白(E蛋白)138位氨基酸向野毒株回復突變對其神經毒力與神經侵襲力的影響。 方法采用重疊延伸PCR技術擴增含有K138E突變位點的DN段,構建乙腦疫苗株E蛋白K138E位氨基酸突變的病毒感染性克隆,體外轉錄病毒RNA,電轉染BHK21細胞拯救病毒,繪制病毒生長曲線,采用蝕斑試驗與測序鑒定突變病毒,通過動物試驗評價突變病毒與疫苗株對昆明小鼠的神經毒力和神經侵襲力。 結果酶切和測序表明K138E突變病毒感染性克隆構建成功,并通過電轉染BHK21細胞包裝得到K138E突變病毒。蝕斑試驗顯示突變病毒的蝕斑稍大于疫苗株,兩株病毒的生長曲線與神經侵襲力無明顯不同,但突變病毒神經毒力顯著升高。 結論乙腦疫苗株E138位氨基酸回復突變后神經毒力增強,E138位氨基酸是調控疫苗株神經毒力的重要位點。