摘要：以繼代培養0.5、1.5 a和3.5 a的抗性黑松37#家系胚性愈傷組織為材料,觀察不同培養時間胚性細胞的形態和體胚成熟的過程,并對愈傷組織的增殖率、每克愈傷形成的體胚數量及體胚萌發率和植株成活率進行測定。結果表明:在繼代培養過程中,胚性胚柄細胞團(ESM)結構逐漸疏松,胚柄細胞呈現縮短、增粗的現象;培養時間對抗性黑松愈傷組織的增殖、分化、體胚萌發及植株成活率均有顯著影響。3種不同培養時間愈傷組織的增殖率分別為200.37%、182.47%和111.63%,每克胚性愈傷組織形成成熟體細胞胚分別為77、31、5個,萌發率分別為84.43%、51.10%、11.13%;植株成活率分別為73.00%、50.00%、6.70%,均呈下降趨勢;3種愈傷體胚成熟的時間也存在顯著差異,繼代培養時間越長,體胚分化成熟過程越慢,愈傷組織形成子葉胚的時間最短為46 d,最長為74 d。因此,抗性黑松胚性愈傷組織在繼代培養過程中胚性逐步降低,體胚發生和植株再生能力下降,短期培養的胚性愈傷組織(0.5 a)為抗性黑松體胚發生較為理想的初始材料,且愈傷組織繼代培養時間不宜超過1.5 a。