摘要:目的:探討N-myc下游調節基因1(NDRG1)過表達對滋養層細胞上皮-間質轉化(EMT)的影響以及對Wnt/β-catenin信號通路的作用。方法:采用攜帶NDRG1基因的慢病毒感染人胎盤滋養層細胞系HTR-8/SVneo,建立NDRG1基因穩定過表達的HTR-8/SVneo細胞株。qRT-PCR和Western blot法檢測慢病毒感染后細胞中NDRG1基因mRNA和蛋白的表達水平,Transwell小室法觀察細胞侵襲和遷移能力,免疫熒光實驗檢測β-catenin蛋白核轉位情況,Western blot法分析EMT相關蛋白、Wnt/β-catenin信號通路相關蛋白及基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9等蛋白表達。結果:慢病毒介導NDRG1過表達后,HTR-8/SVneo細胞中NDRG1 mRNA和蛋白表達水平顯著上調。NDRG1過表達可顯著增強細胞的侵襲和遷移能力,并上調MMP-2、MMP-9、波形蛋白(Vimentin)、神經性鈣黏附蛋白(N-cadherin)、β-catenin、Snail1和環氧化酶-2(COX-2)等蛋白的表達水平,下調上皮鈣黏蛋白(E-cadherin)和糖原合成酶激酶3β(GSK3β)磷酸化水平,同時促進β-catenin蛋白由細胞質向細胞核轉位。結論: NDRG1過表達可促進HTR-8/SVneo細胞EMT過程,提高細胞侵襲和遷移能力,其機制可能與激活Wnt/β-catenin信號通路轉導相關。
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