摘要:目的嘗試建立分離并獲得穩定培養的新生大鼠原代肝細胞(HC)的簡易方法。方法采用多步酶消化法和組織塊培養貼壁法分離大鼠原代HC,經低速離心、選擇性貼壁培養并純化肝細胞。結果最初獲得單細胞數量約1~2×10^6個/只,經0.4%臺盼藍染色細胞瞬時活率>72%,單細胞懸液和組織塊兩種培養方法均在3~5d發現細胞可長滿瓶底的70%~80%,經傳代純化以后細胞經糖原染色和抗CK-18免疫組化染色鑒定,發現HC純度>95%,細胞生長狀態良好,可供一般實驗室使用。結論成功建立了獲取原代培養HC的簡易方法,細胞數量、純度、活率較好,可供一般實驗室實驗研究。
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