摘要:目的:構建CD31啟動子的綠色熒光蛋白和螢光素酶真核表達載體,轉染至內皮細胞系HUVEC和BEND3細胞中,對其生物學功能和活性進行初步檢測,作為鑒定內皮細胞的新方法。方法:從基因組中釣取CD31啟動子的核酸序列,將其插入pGL4.0螢光素酶載體和慢病毒表達載體pCDH-copGFP,經限制性內切酶酶切和測序驗證后瞬時轉染HUVEC和BEND3內皮細胞系及對照MCF7乳腺癌細胞,通過雙螢光素酶實驗檢測其啟動子活性,熒光顯微鏡觀察綠色熒光表達。結果:雙酶切與測序結果表明表達載體中正確插入了CD31啟動子序列;雙螢光素酶實驗和熒光顯微鏡檢測發現CD31啟動子特異性在內皮細胞中表達。結論:CD31啟動子的螢光素酶和綠色熒光表達載體構建成功,可作為鑒定內皮細胞的新型技術手段。
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