摘要:目的:優化Vero細胞培養H7N9流感病毒的培養條件,建立細胞培養病毒高產培養系統。方法:采用不同病毒接種MOI、培養溫度、pH值和TPCK胰酶等條件優化培養H7N9流感病毒Vero細胞適應株A/Shanghai/02/2013(H7N9)Va的條件,并將其連續傳代后擴大至細胞工廠大規模培養。結果:Vero細胞高產H7N9流感病毒培養條件為DMEM/F12和MEM以1∶1混合,并添加0.3mg/mL牛血清白蛋白、1%谷氨酰胺、0.5%雙抗和1.5μg/mLTPCK胰蛋白酶,pH為7.4時,連續傳代病毒血凝效價保持在512,擴大至細胞工廠大規模培養病毒產量穩定。結論:建立的Vero細胞培養H7N9流感病毒條件,能夠持續穩定高產,并適用于細胞工廠大規模培養,有望用于H7N9流感細胞疫苗的大規模制備。
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