摘要：目的:探討采用高效液相色譜法(HPLC)分析三黃湯傳統煎法和現代煎藥機法的指紋圖譜差異。方法:選取10個不同批次的三黃湯配方,配制傳統煎法三黃湯供試品溶液和現代煎藥機三黃湯供試品溶液,色譜條件采用4.6 mm×250 mm的DIAMONSIL C 18保護柱(5μm),以30℃為柱溫,進樣量為15μL,以甲醇為流動相A,1%磷酸水為流動相B,檢測波長為277 nm,進行HPLC指紋圖譜對比研究。結果:三黃湯專屬性良好。線性關系考察顯示黃芩苷回歸方程Y=75.64 X+21.31,r=0.9998(n=5),黃芩苷對照品范圍在0.5~12.0μg/mL,線性考察結果顯示線性關系良好。精密度結果最終取大于總峰面積5%的色譜峰相對峰面積RSD平均值1.776%,三黃湯供試品溶液精密度良好。穩定性結果顯示色譜峰相對峰面積RSD平均值1.843%,三黃湯供試品溶液24 h內穩定性良好。重復性試驗結果顯示色譜峰相對峰面積RSD平均值1.911%,三黃湯的重復性良好。加樣回收率檢測結果顯示平均回收率99.81%,RSD 1.79%,高相液相檢測方法所測加樣回收率結果可靠。樣品測定結果顯示在同一色譜洗脫梯度下,傳統煎法的三黃湯指紋圖譜120 min即完成檢測,而現代煎藥機法制備的三黃湯指紋圖譜在131.87 min才完成檢測;另外從圖譜中可見現代煎藥機制備的三黃湯中色譜峰更多,可能與現代煎藥機的高壓煎煮設備能析出更多共有峰有關。從各自的指紋圖譜相似度中可得,10批傳統煎法三黃湯的相似度和10批現代煎藥機法三黃湯的相似度均高于0.9,其中傳統煎法平均相似度為0.9714,現代煎藥機法平均相似度為0.9816,略高于傳統煎法。結論:傳統煎法和現代煎藥機法制備的三黃湯的HPLC指紋圖譜存在一定差異。