摘要:通過基因挖掘技術獲得一種來源于炭疽芽胞桿菌的短鏈脫氫酶BaCR1。它能夠催化四氫噻吩-3-酮的不對稱還原反應,進而合成碳青霉烯類抗生素硫培南的重要手性中間體(R)-四氫噻吩-3-醇。對BaCR1進行了催化性能表征,結果表明最適反應pH為7.0,最適反應溫度為30℃,催化劑轉化數(kcat)與米氏常數(KM)之比(kcat/KM)為0.25L/(mmol·s)。在100mL的反應體系中,偶聯葡萄糖脫氫酶用于輔酶再生,在底物上載量為50mmol/L、重組大腸桿菌整細胞(干重)上載量為20g/L的條件下,無需額外添加輔因子NADPH,反應24h,轉化率大于99%,還原產物的e.e.值為84%,實現了產物的克級制備,體現了酶法不對稱還原制備(R)-四氫噻吩-3-醇的潛力。
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