時間：2022-10-16 02:55:29
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論文關鍵詞：菠蘿，EST，SSR
菠蘿(Ananas comosus)，鳳梨科，鳳梨屬多年生草本果樹植物[1]，原產巴西，為熱帶多年生草本植物，16世紀時傳入中國生物論文， 有70多個品種，嶺南四大名果之一。菠蘿含有大量的果糖，葡萄糖，維生素A、B、C，磷，檸檬酸和蛋白酶等營養物質。其果味甘性溫，具有解暑止渴、消食止瀉之功，為夏令醫食兼優的時令佳果。另外，菠蘿皮中富含菠蘿酶，有豐富的藥用價值，據國外專家20多年實驗，長期食用菠蘿皮，心腦血管生物論文，糖尿病發病率顯著降低，并有一定的抗癌效果。
近年來分子生物學的發展以及各種分子標記技術不斷出現，使得植物遺傳分析研究得以迅速發展，其中以SSR標記在植物遺傳研究上應用最為廣泛。隨著測序技術成本的降低，GenBank中大量的植物EST數據為SSR分子標記的開發提供了新的途徑[2]中國學術期刊網。EST-SSR除具一般SSR分子標記特點外，還有信息量大，通用性好，開發簡單、快捷、成本低等[3]的特殊優勢。目前許多作物如西瓜[4]、蘋果[5]、香菇[6]、甘蔗[7]已開發大量的EST-SSR，并應用于遺傳作圖、遺傳多樣性[8]等研究上，但在菠蘿栽培種上至今尚未見從EST中開發SSR的相關報道。
本研究對現有菠蘿EST中SSR信息進行全面分析，以明確菠蘿EST-SSR發生頻率和特點，為進一步建立EST-SSR標記并探索其在菠蘿研究中的遺傳作圖、育種材料評價、品種鑒定等的應用奠定基礎。
1 材料與方法
1.1 材料
采集菠蘿幼嫩的葉片于-20℃保存。
1.2 菠蘿EST的獲得及EST-SSR序列查找
從美國國家生物技術中心(National Center for Biotechnology Information，NCBI)的植物基因組數據庫(ncbi.nlm.nih.gov/genomes/PLANTS/PlantList.html)共搜索到5659條菠蘿的EST序列。應用Websat（wsmartins.net/websat/）在線程序搜索EST-SSR。搜索的標準為:二核苷酸、三核苷酸、四核苷酸、五核苷酸和六核苷酸重復序列的重復次數分別大于或等于9、6、5、4和3。
1.3 EST-SSR引物設計
利用Primer Premier 3.0在線程序對包含有SSR的EST設計引物生物論文，引物設計的原則為EST序列長度大于100 bp，SSR序列的開始和結束位置分別距5'和3'端不少于20 bp。引物設計的主要參數為：引物長18~27bp，最適為22bp；引物退火溫度Tm值57~60℃，上游與下游引物的Tm值相差±1℃；PCR預期產物長100~400bp；盡量避免引物二聚體，發夾結構和錯配等。按重復類型的比例挑選30對引物由上海生物工程技術服務有限公司合成。
1.4 EST數據冗余分析
利用VecScreen(ncbi.nlm.nih.gov/VecScreen)及RepeatMasker(repeatmasker.org)去除載體污染和重復序列,對于那些能設計出引物的EST序列，最后通過Tm值和引物序列比對進一步刪除冗余序列。
1.5 DNA提取
采用改良CTAB法[9]提取菠蘿的基因組DNA中國學術期刊網。
1.6 PCR擴增、電泳檢測
PCR反應體系（25μl)：10×buffer 2.5μl，Mg2+ 25mmol/L 1.5μl， dNTP10mmol/L 0.5μl，引物100μmol/L1μl，Taq酶5.0U 0.2μl，模板DNA 20ng/μl 3μl。
反應程序為：94℃預變性5分鐘，94℃變性30秒，51℃退火40秒生物論文，72℃延伸50秒，38個循環，72℃終延伸7分鐘，8℃保存。
PCR產物用6%非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳進行分離檢測，120 V電壓電泳1.5 h后，采用銀染法染色，BIO-RAD Gel Doc2000凝膠成像系統中成像。
1.7 SSR位點的功能分析
對篩選出的SSR提取其所在的基因序列，概念性翻譯成蛋白質序列后，利用Blastp比對，提取相似性最高的序列注釋信息，作為SSR靶向基因的功能注釋，并對SSR位點的注釋信息進行分類。
2 結果與分析
2.1 菠蘿EST-SSR的頻率和分布密度
在5 659條EST序列中，經過篩選共發現SSR序列636個生物論文，占整個EST數據庫的11.24%，表明菠蘿中的EST-SSR十分豐富。經計算去除冗余后的菠蘿EST序列總長約為4.7×106bp，菠蘿SSR分布密度為平均7.39 kb EST就存在一條SSR(表1)，并且不同重復類型的平均距離有明顯差異，EST-SSR出現頻率越高其平均距離則越小。菠蘿EST-SSR中含有二核苷酸、三核苷酸、四核
苷酸、五核苷酸、六核苷酸重復的序列分別占EST數據庫中發現SSR序列總數的42.61%(271/636)、29.25%(186/636)、3.46%(22/636)、4.56%(29/636)、20.13%(128/636)(表1)，說明菠蘿EST-SSR的優勢重復單元為二核苷酸、三核苷酸和六核苷酸，三者共占EST-SSR總數的91.98%。其中二核苷酸重復的出現頻率（42.92%）明顯高于其他類型，三核苷酸（28.93%）和六核苷酸（20.13%）重復的出現頻率也相對較高。重復類型為四核苷酸、五核苷酸的重復所占的比例比較小，只占總SSR的8.02%。
表 1 菠蘿中EST-SSR的數量、比例、出現頻率與平均距離
Table 1Number,Proprotion,frequency and mean distance of EST-SSR inpineapple
重復類型
Repeat type
SSR數量
Number of SSR
所占總SSR比例/%
Proprotion in all SSRs
出現頻率/%
Frequency
平均距離/kb
Mean distance
二核苷酸Dinucleotide
271
42.61%
4.79%
17.34
三核苷酸
Trinucleotide
186
29.25%
3.29%
25.27
四核苷酸
Tetranucleotide
22
3.46%
0.39%
213.64
五核苷酸
Pentanucleotide
29
4.56%
0.51%
162.07
六核苷酸
Hexanucleotide
128
20.13%
2.26%
36.72
總計Total
636
100%
11.24%
1.1采集地點的選擇伊寧縣位于東經80°13′～82°42′，北緯43°35′～44°29′之間，東鄰尼勒克縣，西與伊寧市和霍城縣接壤，南鄰伊犁河，與察布查爾、鞏留兩縣隔河相望。同時，位于伊犁河谷中部，水草豐富，境內的伊寧口岸是伊犁地區重要的貿易口岸。
1.2實驗材料
1.2.1蜱的來源2013年4－5月，從伊寧縣的2個采集點、2個綿羊群，每群＞30只，均未藥浴，采集其體表寄生蜱，共獲得硬蜱324只，放置于潮濕陰暗處，以保持其存活。
1.2.2主要試劑PCR所用試劑均購自上海生工生物工程技術服務有限公司；DNA提取試劑盒（DNeasyBloodTissueKit）購自德國Qiagen公司；其他試劑均為分析純。
1.3實驗方法
1.3.1蜱種鑒定參照《中國經濟昆蟲志》［9］，用普通解剖顯微鏡將324只蜱進行形態學鑒定，初步分類后，從中選取50只用配備數碼照相功能的解剖顯微鏡（LEICAM165C）拍攝圖片，對蜱的盾板、假頭、假頭基、肛側板、氣門板、第一緣垛、孔區（雌蜱）等形態進行對比觀察并測量［11］。1.3.2蜱的處理和DNA提取將蜱標本分別依次用濃度為70%、50%、30%、10%的乙醇溶液于37℃搖床中振蕩沖洗1h，再用超純水反復沖洗，干燥。最后置于消毒滅菌的1.5mlEP管中。按照DNA提取試劑盒使用說明書提取蟲體基因組DNA，置-20℃保存備用。
1.3.3基因擴增用上游引物5′-CTGCTCAATGATTTTTTAAATTGCTGTGG-3′，下游引物5′-CCGGTCTGAACTCAGATCAAGT-3′擴增線粒體16SrRNA序列［12］；上游引物5′-CAAAAWCCTGGTAAAATTAAA-3′和下游引物5′-GCACTATCAAGCAACACGACT-3′擴增COⅠ序列［10］。25μlPCR反應體系：模板1.5μl（約50ng），上游和下游引物各0.75μl（75pmol），50mmol/LKCl，10mmol/LTris⁃HCl（pH8.3），1.5mmol/LMgCl2，1單位TaqDNA聚合酶。PCR反應循環參數為：①16SrRNA為94℃預變性5min，92℃變性30s，54℃退火30s，72℃延伸30s，共38個循環，72℃終延伸8min。②COⅠ為94℃預變性5min，92℃變性30s，50℃退火30s，72℃延伸60s，共38個循環，72℃終延伸8min。擴增片段后送上海生工生物工程技術服務有限公司測序。1.3.4序列分析及系統進化樹構建結合GenBank登錄的圖蘭扇頭蜱的16SrRNA和COⅠ參考序列，將本實驗PCR擴增的6條16SrRNA及6條COⅠ序列測序結果與參考序列比對，運用Mega5.0軟件的ClustalX程序分析，計算遺傳距離并構建遺傳進化樹。
2結果
2.1蜱種鑒定所鑒定蜱共324只（168、156），蟲體體型較小，雌蟲體長3.2～5.5mm，雄蟲體長2.9～3.6mm，呈褐色，背腹扁平似卵圓形，芝麻至米粒大，雌蜱飽血后可膨脹達蓖麻籽大。體分為假頭和軀體兩個主要部分（圖1A）。假頭基呈六角形，側角明顯，后緣微凹（圖1B）。雄蜱盾板覆蓋整個背部，雌蜱盾板覆蓋背前部，前部較窄，后部圓鈍，盾板遍布刻點，以細刻點居多，粗刻點少而零散（圖1C）。眼卵圓，靠近盾板前部邊緣。須肢粗短，中部最寬，前端稍窄。雄蜱氣門板長卵形（圖1D）。體端有緣垛，中垛大于邊垛，常有尾突（圖1E）。有肛溝，雄性肛側板后緣內斜明顯，內緣具角突，長約為寬的2.5～3.0倍，內緣中部稍凹，后緣向內顯著傾斜，其后方凸角明顯（圖1F）。結合有關文獻［9，13］認為伊寧縣的蜱具有硬蜱科扇頭蜱屬圖蘭扇頭蜱的特征。但由于吸血、飽血雌蜱及部分未成熟或形態變異的雄蜱，僅用傳統形態學分類方法不能準確區分。因此，從324只中選出6只雌雄分別具有形態差異的蜱（4、2），根據采集地點分別將其命名為YN-1、YN-2、YN-3、YN-4、YN-5和YN-6。YN-1為當地典型雄性圖蘭扇頭蜱；YN-2和YN-3為半飽血雌蜱，因其腹部吸血膨脹已無法觀察緣垛，肛側板和副肛側板難以區分形態且邊界不清；YN-4、YN-5和YN-6為部分形態特征改變雄蜱，YN4和YN5體端較寬似倒置三角形與典型的圖蘭扇頭蜱卵圓形體端不同，且YN5氣門板呈長逗點形與血紅扇頭蜱氣門板相似；YN6肛側板后緣圓鈍，凸角不明顯。因此對這6只蜱采用分子生物學方法進一步分析，對上述形態學鑒定結果進一步驗證。
2.2分子生物學鑒定
2.2.1PCR擴增通過PCR擴增上述形態學差異較大的6只圖蘭扇頭蜱線粒體DNA，產物經1%瓊脂糖凝膠電泳分析，均獲得特異性很好的PCR產物，與預期目的片段一致（16SrRNA約為460bp，COⅠ約為760bp）。
2.2.2圖蘭扇頭蜱16SrRNA和COⅠ基因片段組成利用Mega5.0軟件計算6只圖蘭扇頭蜱的16SrRNA和COⅠ基因片段堿基組成。16SrRNA基因片段A、T、C、G的平均堿基含量分別為36.68%、37.12%、10.7%和15.5%，堿基A＋T平均含量是73.78%。COⅠ基因片段A、T、C、G的平均堿基含量分別為38.56%、31.78%、14.12%和15.54%，堿基A＋T平均含量是70.34%。
2.2.3圖蘭扇頭蜱基因序列比對及系統進化樹運用Mega5.0軟件的ClustalX程序進行多重序列比對后，16SrRNA獲得2種不同序列，并登錄GenBank，登錄號分別為KF547987和KF547989；COⅠ獲得3種不同序列，登錄號分別為KF688136、KF688137和KF688138。各結合GenBank登錄的3種扇頭蜱的參考序列構建系統進化樹。6只圖蘭扇頭蜱16SrRNA基因片段的遺傳變異很小，共檢測出2個單倍型，1個變異位點。其中YN-2、YN-3、YN-4和YN-5序列相同，為一種單倍型；YN-1、YN-6在216位點處為轉換位點（T-C），為一種單倍型?；蛐蛄斜容^結果顯示同源性均在99.5%以上，遺傳距離為0.3%～0.5%。而上述6只圖蘭扇頭蜱的COⅠ基因片段序列變異較大，共檢測出3個單倍型，4個變異位點。YN-1、YN-2和YN-6序列相同，為一種單倍型；YN-3和YN-5檢測到3個變異位點，均為轉換位點（A-G），無插入/缺失和顛換現象；YN-4在上述變異基礎上，于574位點處發生轉換（A-G）。基因序列比較結果顯示同源性均在98.6%以上，遺傳距離為0.3%～1.9%。
3討論
“商務生態系統”這一概念首先是由JamesF.Moore在他的著作《ThedeathofCompetition：LeadershipandStrategyintheAgeofBusinessEcosystem》中提出的[1]。這個概念的靈感來自于自然界的生態系統。生態環境學認為，生物之間存在一種相互依存、相互制約、互為環境的關系，并且生物的多樣性和共生性是生物界生存和發展的普遍要求和規律。眾多的生物以自己的生存和發展，為其他生物提供共生的環境和條件，同存于一種共生體之中，共同進化和優化。JamesF.Moore指出商務生態系統正是模擬了自然生態系統中的以上這些機制。眾多的商家、企業作為有生命的經濟實體，同時還作為經濟細胞，組成和推動著整個國民經濟乃至整個國際經濟的發展，形成一種功能協調、優勢互補、和諧增長的共生共榮的生態環境。
二、電子商務環境下的新商務生態系統
電子商務環境與傳統商務環境相比有顯著的區別。從傳統意義上說，企業必須在一個特定的行業內進行競爭。但電子商務環境下，一方面，原來處于各個封閉“湖泊”中的不同行業，由于Internet這條“電子運河”而溝通起來，競爭范圍改變了。另一方面，雖然目前有些企業采用了MRPⅡ、ERP、CRM、SCM系統等，但合作伙伴之間的電子化連接（Electroniclinkage）及企業與顧客之間的接口薄弱，難以實現信息實時的、同步的共享。通過先進的電子商務技術（如XML、OBI等）和網絡平臺，可以靈活地建立起各種組織間的、高效的電子化連接，如組織間的系統IOS（Inter-organizationalsystem）、企業網站、Extranet、電子化市場EM等，將伙伴企業各個業務環節孤島連接在一起，從而大大改善商務伙伴間的通訊方式，使組織間的信息和知識的交換量與交換速度大大提高，為形成新商務生態系統提供了有力的支持。
在電子商務環境下，針對企業發展戰略的復雜性，新商務生態系統不僅是一種實施電子商務的戰略途徑，也是一種管理理念的創新[2]。在電子商務環境下，企業戰略的制定應考慮如何建立新的商務生態系統。與系統中的各成員共創新的集成化商務模式和技術標準，共享知識，協調與各成員的關系，并根據商務生態系統發展不同階段（開拓商務生態系統、商務生態系統的擴展、對商務生態系統的領導、自我更新）的特征和自己在系統中所處的地位，培養自身的核心能力，而不是急于攻擊其他企業的領導地位或驅逐弱者。商務生態系統的核心企業會給企業帶來更強的生命力[3]。
三、新商務生態系統的研究狀況及其與當前其他管理思想的區別
商務生態系統亦區別于以產品或任務為目的而組織的動態聯盟（VirtualEnterprise），動態聯盟是建立在機遇產品基礎之上，由多個各有專長的敏捷型企業利用各自的特長聯合起來進行機遇產品的經營生產，產品生命周期一旦結束，聯盟也自行解體，動態聯盟把追求最大程度的敏捷性作為目標。從系統論的角度，商務生態系統則是為適應環境變化而組成的共同體，其形成原因與動態聯盟是有區別的。
四、電子商務生態系統應用分析
（一）英特爾公司的電子商務生態系統
英特爾的投資范圍涉及世界各地多達425家高科技或與之相關的公司，是個實力雄厚的風險投資商，其通過龐大的投資來形成企業協作網絡從而實現互聯網戰略的方法令人耳目一新。英特爾公司為了完成從芯片生產商到互聯網建筑模塊生產商的轉變，僅在2000年，英特爾就收購了12家公司和企業，收購總額約60億美元。
英特爾龐大的戰略投資計劃始于20世紀90年代初期，最初是在PC機和芯片相關技術領域進行投資?，F在主要是在一系列有助于全球性互聯網基礎設施以及互聯網內容和服務發展的領域進行投資。在進行投資時，英特爾著眼于一個整體的生態均衡環境，進行系統化投資，以彌補服務器、客戶端、網絡、服務和內容等方面的技術或內容的“差距”。接受英特爾投資的企業不僅可從英特爾的財政資助中獲益，還可利用其帶來的大量與互聯網相關的計算平臺和網絡的專門技術，并可與其他同行協同制定技術標準。通過和那些不斷開拓前進的公司合作，英特爾的工程師可更大范圍地接觸各種理念，這對公司未來的產品和技術開發產生了非常有益的影響。
（二）阿里巴巴的電子商務生態系統
阿里巴巴不是單獨依靠自己的企業在為消費者創造價值，阿里巴巴現在的成功是通過自身建設的平臺來主導整合龐大的系統成員架構了一個強大的商業生態系統[4]。
阿里巴巴通過提供誠信通服務產品建立誠信體系使得整個系統從中受益，而且誠信通產品對誠信的評估標準和程序很大一部分授予給了用戶和合作伙伴，例如，誠信通產品中的商家認證交給新華信、華夏和鄧白氏等第三方認證機構，誠信檔案由網商主動反饋的記錄構成，阿里巴巴并不需要維持復雜并且昂貴的中央監控和誠信評價系統。
阿里巴巴對網商提供各種服務來幫助網上交易。例如，防騙打假的培訓，提供貿易通產品幫助網商即時聯系，阿里巴巴對網商的服務從保姆式轉向教練式，鼓勵網商參與到信息的維護中來，使網商成為系統中的主角，并有配套工具方便用戶。
阿里巴巴更大的價值空間是由系統中的成員來創造完成。正如自然生態系統中陽光、空氣、水和土壤不可缺少，阿里巴巴捏合的誠信、商機、互動和規模這四種要素對于其商業生態系統也是缺一不可，而且神奇的是，僅僅這四種要素就能孕育出網商生命體自我成長。
阿里巴巴不但在創造價值，他還與生態系統中的其他成員分享自己所創造的價值。阿里巴巴向網商提供服務產品收取的費用相對于阿里巴巴為網商創造的價值是物有所值的，統計數據顯示，阿里巴巴誠信通會員的成交機會是普通會員的6倍，這給會員帶來的價值遠大于他們的支出，因此阿里巴巴付費會員迅速增長。
（三）易趣和淘寶商務生態系統的競爭
在淘寶決定進入市場之前，易趣是明顯的領導者，獨霸C2C交易市場。淘寶進入這個市場之前，由于無法與易趣抗爭于是采取了瓦解易趣商務生態系統的策略：免費。用戶交易、登陸都是免費的。這招武器很有威力，雖然一開始易趣的主流賣家不會流失到淘寶，但是那些無法在易趣掙到錢而又要交店鋪費的小賣家和學生賣家都會加入淘寶，包括易趣有些賣家同時也會在淘寶開店，因為這是零成本和有收益期待的。總結來說淘寶的策略就是：燒錢開路，鋪入大量資金營銷。淘寶期待的是什么呢？實際上是形成一個更大的商務生態系統，引發網絡正反饋循環：隨著人氣的增多，交易增加，賣家會更積極投入增加；賣家增加反過來又吸引買家不斷加入登陸平臺。
淘寶網總價值：投入的資本+網絡的價值=易趣的總價值：運營的收益+網絡的價值。
奧秘在于：為了維持這個等式，最初淘寶需要投入大量的資本，但是隨著時間的推演，易趣沒能采取有效措施阻止淘寶網網絡價值的增值（網絡價值很大程度上可以用用戶規模和交易量來衡量），于是同樣的等式下，淘寶網絡價值的增長大于易趣網絡價值的增長，而由于運營的收益與網絡價值是正相關的，為了維持等式，淘寶網投入的資本量會越來越小，或者說投入同樣的資本量，淘寶的網絡價值會越來越大，這個時候原有的平衡就會被打破，易趣要么有所投入，要么找到增加網絡價值的新方式，例如，易趣目前所做的將國內平臺和國際平臺對接，為用戶增加外貿機會的舉措以及重新準備投用第三方擔保支付模式等等。
五、電子商務生態系統的啟示
未來的競爭不是企業和企業之間的競爭，而是商務生態系統和商務生態系統之間的競爭。企業所處的環境是變化的，沒有人能夠完全預知未來，一切取決于企業的智慧和應對策略。但是有一點是明確的，哪個企業勝出取決于哪一方的系統更有競爭力更有價值，雙方都要慎重考慮自己的生態體系是否更有競爭力。
現在的企業從事電子商務從更確切的角度講，不是采用了一種新的工具和技術或營銷手段，而更是在接受一種新的商業理念的啟蒙，從接受電子商務實踐電子商務的那一刻起，整個企業都會隨之發生變化，進入了一個轉型的軌道。
電子商務是ICT和商業這兩個互相具有強關聯性的要素直接碰撞的果實。因此，電子商務產業內必然首先遇到并首先實踐一個或幾個核心企業，在前所未有的空間內大規模相互協調，將資源集中起來，甚至將消費者也融合進來形成一個共同進化的生態體系。
商務生態系統超越了傳統的行業界限，它既可以在常規的行業界限內部成長，也可以跨越常規的行業分界線，這種理論方法適合于電子商務突破行業范圍的特性。商務生態系統理論不僅提供了理解電子商務環境下的各種戰略聯盟的方式，也可以從新的角度系統地思考企業未來的發展趨勢，幫助企業制定正確的戰略，預測潛在的變化，采取恰當的行動，并有效地規避和減少風險，從電子商務中充分獲益。
參考文獻：
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關鍵詞：分子生物學；課程教學；改革研究；創新生物學人才
分子生物學的目標是在分子水平上闡明細胞活動的規律，從而揭示生命的本質[1]。雖然它在生物類專業課程體系中充當著重要角色，對生命科學的發展起著至關重要的作用，但是分子生物學的教學卻因為課程內容多，學科交叉廣，理解難度高，信息量大，知識更新快而使教學效果差強人意，集中表現為教師授課難和學生學習難。這種現狀不但困擾著老師和同學，也與大學培養高素質創新型人才的目標不相適應。如何克服分子生物學課堂教學的“瓶頸”？本人在從事十多年的分子生物學教學過程中，努力研究和探索多種形式的教學改革，力求提升教學效果和教學質量。
一、教學內容的合理組織
分子生物學的教學除了選用好的教材，制定完善的教學大綱，如何組織教學內容是教學的一個非常重要環節[2]。教學內容呈現給學生的應該是完整、清晰的、有層次、條理的知識。我們在組織教學的過程中，首先從提高自身學科素養著手?！耙槐窘滩臅瑪捣N參考書”，除分子生物學國內、國外各類版本外，與分子生物學相互交叉和滲透的其他學科，如細胞生物學、生物化學、遺傳學，我們也都進行了系統的學習和強化，不斷夯實專業知識、拓展專業領域，基本構建了分子生物學完整的知識體系，具備了對教材處理的前提。既避免了教學中各學科的重復，也進一步凝練了知識。此外，我們還通過網絡教學平臺向全國優秀教師學習，在不斷的探索中總結出了教學內容合理組織的一些思路。1.思維導學模式。在DNA復制教學環節，知識點多，并且較分散，很容易在教學中造成學習困難和知識混淆的現象，針對這章教學的特點，我們采用了思維導學模式，收到了非常好的教學效果。2.重點、難點解讀。本科教學形式多樣化，也更提倡學生的自主學習，但并不是淡化了教師的教學，反而對教師提出了更高的要求[3]。教師必須圍繞每堂課的教學目的，合理組織和引導學生理解并掌握教學的重點和難點內容。比如在講解染色體端粒末端修復機制中，教師首先要從教材的知識結構中梳理出重點。染色體端粒末端修復機制的知識點包括：（1）引物切除造成的遺傳信息缺失；（2）端粒末端的特點；（3）體細胞和性細胞末端修復機制的不同；（4）DNA結構的變化；（5）端粒酶的修復機制。梳理知識點后，總結教學重點：一是引物切除后損傷修復在體細胞和性細胞中的不同；二是四鏈DNA結構；三是端粒酶的修復機制。其中端粒酶修復機制的講授是學生學習的難點。難點集中在端粒酶的性質和修復發生的過程。經過對教學內容中重點和難點的準確把握和合理組織，教師才能在課堂教學中突出重點、突破難點，讓學生的課堂學習無障礙。
二、教學方法和手段的改進
教學方法的推陳出新，是教學改革的重要內容[4]。為發揮學生作為教學主體的能動性，我們根據具體的教學內容設置了啟發式、聯想式、探究式等多種教學方法[5]，讓學生參與到教學過程中，不僅活躍了課堂氣氛，而且在分享知識的同時，更注重教會學生靈活掌握學習的方法。
1.啟發式教學。啟發的目的在于舉一反三，觸類旁通。針對每一次的課堂教學，設計一些拋磚引玉的問題，供學生思考與討論，這成為了分子生物學理論教學的重要組成部分。如進行到真核生物基因表達調控學習環節，提出甲基化修飾的生物學意義，這個問題覆蓋范圍廣，涉及到了DNA復制的調節、蛋白質和DNA甲基化修飾對基因表達的調控，以及Epigenetic（表觀遺傳學）方面的知識。通過提出問題—討論分析—不斷啟發—再討論分析—歸納總結—解決問題這一系列的互動教學活動，充分調動了學生課堂學習的主動性和積極性，在不斷的討論分析中通過展示不同的思維、發表各自的觀點，不但有利于促進學生在學習中發現問題、解決問題，而且有利于學生通過對基礎知識的消化、理解來達到理論的升華、拓展[4]。
2.聯想式教學。分子生物學是在生物化學、細胞生物學和遺傳學的基礎上發展而來[6]，因此知識相互交叉、相互滲透。在授課的過程中，教師一方面要避免重復，一方面要通過聯想知識點適時培養學生的發散性思維，提高學生對知識的遷移能力和整合能力。如在講解化學修飾對基因的表達調控時，將細胞生物學中的信號轉導有機結合，使學生了解基因表達調控對細胞信號轉導的作用機制。
3.探究式教學。在分子生物學教學中，每一個理論知識的背后都是科學研究的重大突破。如確定遺傳物質是DNA的兩大經典實驗，我們以探究的形式呈現教學內容，從實驗設計，到結果顯示，再經過討論分析并得出結論，以課題研究的角度，研究人員的身份引導學生進入學習角色，將學科概念、理論產生的起因和過程展示給學生，啟發學生努力探索，走近科學，讓學生從中領悟知識形成的探究性和科學性，逐漸培養具有創新意識和能力的高素質研究型人才。4.多媒體多樣化教學。分子生物學的教學內容具有微觀性、復雜性、抽象性和動態性。傳統的教學手段無法滿足教學的需求，而多媒體技術則具有聲像俱佳、動靜皆宜的特點[7]，是傳統教學無法比擬的。多年來我們不斷補充和完善教學手段，逐漸形成了獨具特色的多媒體教學課件。多媒體圖像處理清晰直觀，文字表述簡潔明了、主題突出。課件中的圖像來源于國內外的網絡數據平臺。如講述DNA半保留復制機理時[8]，首先將DNA可能存在的幾種復制方式用圖像展現，并利用Meselson和Stahl設計的DNA復制同位素示蹤實驗和密度梯度離心實驗來進行結果驗證，引導學生明確掌握DNA半保留復制特點，并結合文字，通過圖文并茂的多媒體課件，將教學內容中的背景知識、基本概念、基本理論，以及靜態、抽象的微觀知識清晰講解。多媒體課件動靜結合、聲像互動。對于生命過程中動態的知識點，比如DNA的復制、RNA的轉錄、蛋白質的翻譯過程，可以將這些復雜的生命過程利用多媒體手段做成動畫并配以文字和聲像，形象直觀地展現給學生，既加深了學生對知識的理解，也提高了其學習效率。
三、知識領域的拓展
分子生物學的教學內容除包含基礎理論知識外，還有大量理論應用的研究方法部分。我們在教學中不僅僅將知識局限在教材中，利用課堂教學不斷引導學生去了解本學科相關領域內的研究熱點、最新進展、發展趨勢[8]，以及生物技術在生產實踐中的廣泛應用。
1.專題講座與專題討論。專題講座是教師根據教學內容，自己組織參考資料對教學內容的延伸與拓展。比如在講授“SNP技術”時，先從遺傳標記分析的發展著手，把一代、二代的標記分析做知識性的回顧，再將納入教材的第三代標記分析“SNP”做詳細的講解，引導大家理解什么是單核苷酸多態性，核苷酸多態性研究的生物學意義以及在醫學、農業、畜牧等多種領域的發展與應用。通過這種方式激發了學生的學習熱情和求知欲，也使教師不斷地進行知識的更新，及時了解本學科當前發展的趨勢、研究的熱點以及爭論的問題。專題討論則是以學生為主體，根據課程教學內容，組織學生就某一個專題自行查閱、組織文獻資料，并在課堂上展開討論[9]。比如在講授基因重組的教學內容時，設計“轉基因的利與弊”供學生討論。引導學生思考基因工程藥物和轉基因動植物對社會產生的巨大影響，讓知識離開課本走進生活，從而喚起學生學習的興趣和探索未知領域的欲望。這不僅使學生更加深入、系統地理解所學知識，并且培養了學生靈活運用知識的能力[10]。
2.生物信息技術與數據庫。生物信息技術已經發展成為分子生物學研究方法中不可分割的一部分，比如在“PCR技術”的專題講座中，不僅要對實驗目的、原理、操作以及應用進行講解，還要特別對引物設計的生物信息技術進行補充，介紹學生對一些常規的生物信息技術軟件Primer6.0、DNAman、Olig6.0、DNAS-tar、Cluster等有一個基本的認知度。在整個分子生物學的教學中，學生需要自行查閱和組織各種文獻資料，因此，必須特別強調互聯網資源運用的重要性。教師通過介紹中國知網、維普、清華同方、NCBI等幾個常用資源庫，使學生了解如何利用資源庫進行查詢，對互聯網資源的熟練應用使學生的知識體系得以完善，學生通過自身的努力來提高信息收集和辨別的能力，培養了學生的自學能力。
四、教學改革中應該注意的問題
1.教師的專業修養與教學基本功。教師在教學中具有雙重身份，既是一名導演，又是一名演員。作為導演，首先需要有最新的教學理念，整個教學過程中適時設問、適時討論、適時啟發。其次要有較強的課堂組織能力，根據學生的學習情況，把握課堂節奏，調動學生課堂學習激情，使教學有的放矢。否則會在教學中出現“啟而不發”和論證條理不清的現象；作為演員，還要有良好的課程駕馭能力，通過教師扎實的專業知識、廣泛的認知領域、全面的知識結構，呈現給學生的是一個豐盛的知識大餐，而不是一鍋夾生飯。因此作為教師，必須從理論水平、科研水平、思維水平這3個方面提高教師自身的專業素質，此外，還要掌握適合自己的各項教學技能。
2.多媒體教學的合理應用。多媒體教學只是一種提高教學效果的輔助手段，是為教師的教學和學生的學習服務的，只有運用合理才可能達到好的效果。因此盡量避免在多媒體教學課件上出現過多的文字，否則多媒體成了教學活動中的主體，老師由照本宣科轉變為扮演放映員和播音員的角色。學生的學習興趣不高，教學效果也就適得其反。多媒體和傳統教學只有合理地結合，取長補短，才能在課堂教學中體現出其真正的價值?？傊虒W改革的目標是幫助學生建立學科知識體系，培養學生良好的科學素養，提升學生后繼學習的能力。正如葉圣陶先生所說：“教師的教學，不在于給學生搬去可以致富的金子。而在于給學生點金的指頭?！蹦壳埃覀冴P于分子生物學課堂教學改革還處于不斷探索和實踐階段，除了需要不斷地提高教師自身的學科修養和科研素質外，也以“夯實基礎、拓展知識、增強能力、提高素質”[8]作為教學的目的和人才培養目標，努力在今后把教學工作開展得更加有生有色，為社會培養更多高素質創新型人才。
作者:武曉英 喬宏萍 張猛 吳麗華 郝雪峰 單位:太原師范學院
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摘要：從主營業務收入和凈利潤、凈資產收益率、每股收益和每股凈資產及市場潛力等方面，實例分析了我國現有的18家生物醫藥產業上市公司的發展和資本經營情況，進行了總結并提出了相關建議。
關鍵詞：生物醫藥；上市公司；實例研究；資本融資環境；資本市場
自1993年6月29日我國第一家醫藥公司—哈醫藥在上海交易所上市以來，經過十多年的發展，至2009年3月我國共有醫藥上市公司100家，醫藥板塊作為朝陽產業廣受投資者關注。醫藥上市公司已成為我國醫藥行業中具有一定規模和市場競爭能力的優勢群體，成為我國醫藥產業發展的主力。其中屬于生物醫藥領域的上市公司有18家，占醫藥行業的18％，代表了目前我國生物醫藥產業利用資本市場的總體狀況。筆者將對這18家生物醫藥上市公司進行資本市場利用現狀的實證分析，以期對利用資本市場促進我國生物醫藥產業發展提供有益借鑒。
1生物醫藥產業上市公司總體發展概況
生物醫藥是一個投入相當大的產業，前期的研究開發與后期的產業化都需要雄厚的資金作為保障。生物醫藥業的發展需要資本市場為其注入資金、專業技術和人才等多種現代生產要素。生物醫藥公司上市是走向資本市場利用的有效途徑，上市后的生物醫藥公司可成為龍頭企業，擁有組織制度優勢、市場組織優勢以及資金、技術和人才等優勢。
至2008年底，我國已有18家生物醫藥概念的股份公司上市發行股票，利用資本市場直接融資，籌集到大量生物醫藥業發展資金，同樣也說明我國生物醫藥業目前對資本市場的利用主要是通過股票市場進行的。自1993年第一家生物醫藥類公司—四環生物上市以來，深、滬A股市場生物醫藥類上市公司的數量不斷增加，迅速發展到2008年的18家，流通A股從最初的9億元增長至44．08億元，增長了3．9倍。可見，生物醫藥業類公司整體籌資能力在不斷增強，生物醫藥業的投入不斷加大，有力推動了我國生物醫藥業的發展。
2生物醫藥產業上市公司資本經營情況分析
生物醫藥類企業發行上市進入證券市場，打開了通往資本市場融資的道路，為生物醫藥業的快速發展提供了資金支持。生物醫藥上市公司積極在資本市場上進行資本運營，為生物醫藥業的產業化發展創造了良好的融資環境，企業實力不斷增強，業績穩定增長，為各公司上市后實施配股或發行債券創造良好條件。適時分析該類上市公司的資本運營情況，結合企業實際、經濟發展內在要求以及資本運營的規律，發現行業發展中存在的問題，適時進行資產調整與重組，推進產業結構的優化與升級，對于該類上市公司持續利用資本市場發展生物醫藥產業具有重要意義。
2．1主營業務收入和凈利潤分析
2002－2007年，我國生物醫藥上市公司的主營業務收入總體呈穩步增長趨勢（見圖1）。2002年平均每個公司主營業務收入為3.267億元，占醫藥類上市公司平均值的31．87％；2007年平均每公司主營業務收入已達到4.291億元，占的醫藥類上市公司的26．78％，年平均增長0.205億元，年增長率為5．89％。其中，長春高新、北海國發、交大昂立、錢江生化、星湖科技、誠志股份等6家公司的年平均主營業務收入在4億元以上，收入增長幅度明顯高于行業平均水平3．842億元，年平均增長7．119億元；其余12家上市公司年平均主營業務收入低于行業平均水平，年平均增長僅2．102億元。由此可以看出，在主營業務收入方面，僅1／3左右的上市公司以較大幅度增長，而大多數上市公司的年平均主營業務收入徘徊在2億元左右。
2002－2007年，生物醫藥類上市公司的平均每公司每年凈利潤為0.149億元，占醫藥行業整體水平的23．97％，變化范圍在0.01-0.31億元之間，年際間有較大的變化幅度。北生藥業、銀廣夏、深本實、四環生物、長春高新等5個公司的平均年凈利潤為負值，萊茵生物、達安基因、交大昂立、誠志股份、四環藥業、上海萊士、天壇生物、雙鷺藥業、華蘭生物、科華生物等10個公司的平均年凈利潤為0.519億元，是生物醫藥類上市公司平均水平的3．48倍。由此可見，生物醫藥類上市公司的凈利潤年際間存在明顯波動，體現出一定的風險性特點，但超過一半以上的該類企業仍然可以獲得較大的凈利潤。
結合圖1來看，生物醫藥上市公司的主營業務收入和凈利潤在2002－2003年、2004－2007年分別是兩個逐年增長的過程。但在18家生物醫藥類上市公司中，1／3左右的公司主營業務收入和一半以上的公司凈利潤都明顯高于行業平均水平，這些公司應該屬于本行業的優勢企業。但其主營業務收入雖逐年增長，凈利潤卻依然存在年度間的大幅增減變化，說明其年際間存在明顯的成本增減變化。
2．2凈資產收益率分析
凈資產收益率反映企業自有資金投資收益水平和資本運營的綜合效益，是企業獲利能力的核心指標。該指標越高，企業自有資本獲取收益的能力越強，運營效益越好，對企業投資人和債權人權益的保證度越高。2002－2007年，生物醫藥類上市公司的凈資產收益率分別為1．41％、9．02％、8．23％、2．41％、－3．74％和3．85％，年度間有明顯差異。但誠志股份、達安基因、天壇生物、萊茵生物、華蘭生物、雙鷺藥業、科華生物、上海萊士等8個公司年平均凈資產收益率為16．83％，公司之間的差異范圍在5％-35％之間，年際變化幅度為12％－22％，屬于具有穩定凈資產收益的企業。而四環藥業、北生藥業、深本實、長春高新、四環生物、星湖科技等6個公司的年際間平均凈資產收益率為負值，屬于自有資本獲取收益能力和資本運營效益較差的公司。說明生物醫藥上市公司之間、年際之間其資本收益和資本運營效益存在差異，也是其經營風險的體現。
2．3每股收益和每股凈資產分析
每股收益反映企業普通股股東持有每一股份所能享受的企業利潤和承擔的企業虧損，是衡量上市公司獲利能力時最常用和綜合性較強的財務分析指標。每股收益越高，說明公司的獲利能力越強。2002－2007年我國生物醫藥類上市公司的平均每股收益為0．13元，年際間變化范圍在
－0．06－0．23元之間，公司間變化幅度在
－0．76－1．01元之間；其中上海萊士、雙鷺藥業、華蘭生物、科華生物、萊茵生物、達安基因、天壇生物、誠志股份、交大昂立等9個公司的每股收益高于生物醫藥業平均水平，達到平均每股收益為0．45元，公司間變化范圍在0．13－1．01元之間，年際間變化范圍在0．33－0．47之間。但深本實、北生藥業、銀廣夏、四環藥業、長春高新、四環生物等6個公司年平均每股收益為負值，星湖科技、北海國發和錢江生化等3個公司的年平均每股收益僅0．02－0．06元，遠低于平均水平。
每股凈資產是上市公司年末凈資產（即股東權益）與年末普通股總數的比值。2002-2007年生物醫藥類上市公司的6年平均每股凈資產為2．16元，年際間在1．75-2．57元／股之間波動，公司之間的差異范圍在－3．24－4．23元／股之間。除了深本實和ST銀廣夏的為負值外，其余公司的均為正值，其中雙鷺藥業、交大昂立、華蘭生物等12個上市公司的每股凈資產高于生物醫藥行業整體平均值，年際間變化幅度在2．73－4．04元／股之間，公司間差異范圍為2．31－4．23元／股之間。
通過以上分析，筆者認為，生物醫藥類上市公司在2002－2007年間利用資本市場進行資本運營，總體呈現出穩定發展的趨勢，但是生物醫藥公司之間和年際間存在明顯差異，其中50％左右的公司平均每股收益和每股凈資產均比較高，顯示出穩定的高水平發展優勢，其資本經營狀況良好。
2．4我國生物醫藥類上市公司的市場潛力分析
生物醫藥類上市公司與其他行業類上市公司比較，其股票具有更大的市場增長潛力。因為投資者投資股市除了希望獲得眼前的穩定收入外，更多的是期盼企業的高成長性和具有良好的未來發展前景。因此，具有高技術、高投入、高收益、高風險特征的生物醫藥類高新技術產業，必將是投資者投資追逐的熱點領域。
（1）生物醫藥業是典型的高新技術產業。生物技術是當前高新技術研究開發的一個熱點，生物醫藥作為生物技術開發應用的前沿之一，在生物醫藥研發領域有著廣闊的應用前景。因此，高科技與資本對接，為生物醫藥類企業提供誘人的發展空間。作為典型的高新技術產業之一，生物醫藥產業既有很高的投資收益和廣闊前景，技術創新活動又充滿風險性。但是風險往往與機遇并存，這也是風險投資的魅力所在。只不過在投入生物醫藥技術創新活動時，企業經營管理者注意采取一切可能的措施來進行風險控制即可盡可能地避免之。
（2）獲利能力與上市公司本身直接相關。從每股收益來看，2002～2007年有67％的生物醫藥上市公司具有獲利能力，50％的公司具有良好的業績，年平均每股收益達到0．45元，明顯高于醫藥行業的年平均每股收益0．23元。其余1/3的上市公司年平均每股收益為負值，盈利能力較差。說明年平均每股收益在公司之間存在顯著差異，資本運營好的公司可以獲得明顯高于醫藥行業平均水平的每股收益，對于投資選擇來說這也是風險性的一種體現。
（3）資產負債率較低，凈資產收益率較高。除深本實和銀廣夏兩個公司外，其余16家生物醫藥上市公司2006年的平均資產負債率為41．62％，明顯低于醫藥行業平均資產負債率60．83％。2002－2007年醫藥行業的年平均凈資產收益率為0．64％，而生物醫藥業為3．53％，其中近半數的上市公司更達到了16．83％?？梢娚镝t藥類上市公司在醫藥行業上市公司中的突出地位。
綜上所述，約30％－50％的生物醫藥類上市公司在主營業務收入、凈利潤、凈資產收益率、每股收益和每股凈資產等指標方面明顯高于該類上市公司的平均水平，屬于本行業的優勢企業，具有良好的資本運營和獲利能力；除此之外，年際間的差異也是影響生物醫藥類上市公司資本市場利用潛力的因素之一。
2．5生物醫藥上市公司的優勢分析
2003－2007年生物醫藥上市公司的年平均主營業務收入達到39572．78萬元，是非上市生物醫藥公司的7．04倍；上市公司的年平均利潤為5624．29萬元，是非上市公司的29．73倍。我國生物醫藥上市公司的平均主營業務收入和利潤都比遠比非上市公司的高，充分說明生物醫藥類企業利用資本市場的優越性。
3結語
目前我國生物醫藥上市公司積極在資本市場上進行資本運營，為生物醫藥業的產業化發展創造了良好的融資環境，企業實力不斷增強，業績穩定增長，為各公司上市后實施配股或發行債券創造良好條件。
2002－2007年，我國生物醫藥上市公司利用資本市場進行資本運營，總體呈現出穩定發展的趨勢，其中約30％－50％的生物醫藥類上市公司在主營業務收入、凈利潤、凈資產收益率、每股收益和每股凈資產等指標方面明顯高于該類上市公司的平均水平，屬于本行業的優勢企業，具有良好的資本運營和獲利能力；除開公司本身因素外，年際間的差異也是影響生物醫藥類上市公司資本市場利用潛力的因素之一。
由于生物醫藥業是典型的高新技術產業，成為投資者投資追逐的熱點領域。年平均每股收益在公司之間存在顯著差異，資本運營好的公司可以獲得明顯高于醫藥行業平均水平的每股收益。大多數生物醫藥公司的資產負債率較低，凈資產收益率較高。因此，我國的生物醫藥企業具有良好的市場潛力。我國生物醫藥上市公司的平均主營業務收入和利潤都比遠比非上市公司的高，充分說明生物醫藥類企業利用資本市場的優越性。
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生物化學實驗既是實踐教學的課堂，又是學生理解、掌握和運用知識的重要途徑。利用生物化學實驗課可以進一步拓展其與理論知識相聯系的空間。然而在實驗課上，我們發現部分學生只會按部就班地操作，只重視實驗結果正確與否，采取應付了事的做法。因此，在實驗開始時我們可以采用提問等方式幫助學生復習鞏固相關的理論知識，引出實驗目的，這樣學生就會充分認識到理論知識對于指導實驗操作的重要性;而另一方面，實驗結束時總結分析，通過實驗操作也加深了對理論知識的進一步理解。實驗過程中，應激發學生動手實踐的興趣，增強其獨立完成實驗的信心，注意并引導其注重觀察實驗現象，遇到實驗結果不一致的情況，我們應鼓勵他們自己尋找原因，從而培養他們敏銳的觀察力和鍛煉他們分析、解決問題的能力。例如在“溫度影響尿素酶活性因素”的實驗中，應該是55度反應的試管中顏色最深，可部分學生做出的結果不盡相同，這就要引導他們思考分析在實驗操作中是否注意“預溫”、“按一定順序滴加試劑”等細節。
2實驗教學應注重培養基本實驗技能
熟練扎實的實驗技能是能否做好一個實驗的先決條件，規范操作是保證實驗結果準確可信的必要前提。因此在第一次做實驗時就要給學生強調實驗技能在實驗過程中的重要性，以便學生自主加強基本技能和基本操作的訓練，如試管、燒杯的刷洗，刻度吸管、加樣槍的使用等。教師要認真示范，不僅要教會學生如何使用，而且要求學生熟練掌握使用方法，對可能的錯誤操作進行特別的提醒。實驗中不斷巡視督促，及時指正學生在操作過程中出現的錯誤。對首次使用的儀器簡要介紹其原理，嚴格按儀器的操作規程進行示范，讓學生養成認真嚴謹、規范操作的實驗習慣，從而提高實驗課的質量。
3實驗教學應積極探索新的教學模式
傳統的實驗教學主要是以驗證性、基礎性實驗為主;且實驗教材內容稍顯陳舊，技術手段滯后，不能反映當今科學的前沿。同時由于實驗預期結果較明確，容易造成學生興趣不高、消極怠工，編造數據或是抄襲報告的現象時有發生［2］。近年來，生命科學尤其是分子生物學的發展迅速極快，應盡可能地讓學生接觸和了解更多的新技術、新知識。同時為了順應醫學發展的需要，培養基本功扎實、動手能力強的高素質醫學人才，我們改變原有教學理念，積極探索新的實驗教學模式，將實驗內容分成2個實驗模塊，即生物化學實驗和分子生物學實驗，涵蓋了生物化學與分子生物學的基本實驗技術，鍛煉了學生的動手與思考能力，體現了設計性和綜合性，也促進了師資隊伍學術水平和教學水平的提高。
例如我們將“影響酶活性因素”調整為設計性實驗，通過設立相關的問題和討論點，指導學生查閱文獻資料、合理制定方案、自行開展實驗，引導學生思考、討論、分析和評價問題。這種提問式、引導式的實驗教學新模式始終讓學生處于主體地位，能激發學生的學習熱情，活躍課堂氣氛，有助于學生科研素養的養成和創新綜合能力的培養。同時也進一步增強了教學老師的綜合素質，提高了教學的品質，從而達到實踐教學與理論教學互融互動的良好效果［3］。而通過綜合性大實驗的開設，有助于學生對于各章節理論知識的掌握和融會貫通。例如我們開設了“基因組DNA的提取、檢測及PCR擴增”、“質粒DNA抽提、酶切、連接”、“感受態細胞的制備及重組質粒的轉化鑒定”三個分子生物學綜合性實驗，構成了一個完整的基因工程的實驗流程，使學生對重組DNA技術的基本原理和操作步驟有了直觀的認識，并掌握了離心、電泳、分光光度技術等生化重要技術。每一個實驗之間環環相扣，相輔相成，前一個實驗的成功與否直接會影響接下來的實驗結果。因此如果想完整地做好一個綜合性大實驗，學生的注意力會更加集中，而且在實驗的過程中無論從理論知識方面，還是實驗技能的操作方面都會得到很大程度的提高。
1.1選課學生的分子生物學背景知識：
對選課學生的分子生物學背景知識的調研發現：在選課人群中，90.7%的學生缺乏分子生物學的理論背景知識（31.40%學生沒有了解，59.30%的學生了解不多），僅有不足10%的學生對分子生物學理論知識比較了解或進行過系統學習，見表1。這就要求我們在講解分子生物學技術之前，需要介紹必須具備的分子生物學基本理論知識。大于50%的學生從未接觸過分子生物學技術，有過動手操作經驗的僅為16.28%。提示我們的實驗教學要循序漸進，給學生充分的操作時間與足夠的訓練。如果能對選課人群在開課前進行初步的調研，根據其分子生物學知識背景分組授課，有望達到更好的教學效果。
1.2課程設計與安排：
我們對學生選修本門課程的動機與預期學習目標進行了調查，結果見表3。研究表明，77%的學生以掌握實驗技術作為學習本門課程的主要目標，體現出對于本課程實用性的一致要求。進一步深入分析研究生科研對分子生物學技術的共性需求，對提升本課程的實用性具有重要意義。同時，突出實驗的可操作性，增加學生動手機會、提高操作水平也是本課程的改革需要重點考慮的內容。與選課學生的預期目標對應，多數的學生希望增加動手操作的機會，72.09%的學生希望實驗準備工作主要由學生完成，15.12%的學生希望全部的實驗準備均由學生完成，體現了學生希望掌握分子生物學實驗技術全流程的急迫性。對于教學模式，以“科研設計-實施”為核心的教學方式更加受到學生的青睞，80%以上的學生認為比較感興趣這種授課方式。
2討論與建議
分子生物學技術已經廣泛應用于中醫藥各個研究領域。掌握分子生物學技術業已成為我校研究生的迫切需求，選修分子生物學實驗是其掌握基本實驗操作、提高科研素養的重要途徑之一。根據本次調查的結果，我們認為分子生物學實驗課程可以重點進行以下幾方面的改革，以進一步滿足研究生學習與科研的需求。
2.1補充基礎理論知識：
本校的研究生生源背景多樣，但以中醫藥相關專業為主。在本科階段接受的訓練中，關于分子生物學的基礎理論接觸相對較少。如果實驗課程的教學僅僅講授實驗操作步驟，難以使學生理解實驗原理、實驗操作步驟的意義，也難以讓學生具備科學分析實驗結果、改進實驗步驟的能力。因此，在實驗課教學中，在講授實驗原理、步驟方法等常規內容外，還必須深入淺出介紹實驗技術涉及的分子生物學基礎理論知識，彌補其原有知識結構的不足。根據學生分子生物學背景知識層次不齊的特點，可以嘗試通過課前調研、分班授課提高教學效果。
2.2增加動手操作機會：
由于實驗樣本和教學課時有限，一方面部分學生只是參觀別人做實驗，并未親自動手；另一方面，教師完成了大量的實驗準備工作，學生只是參與了“正式”的實驗過程。但是，作為研究生應用分子生物學技術獨立從事科研活動，實驗的準備、實施、數據分析整理的全過程都必須親自完成。為了提高教學效果，提高研究生動手能力，建議研究生參與分子生物學實驗的全過程（包括實驗準備及善后），并建議研究生每人可以獨立完成1個樣品的全程分析。
2.3鍛煉科研設計能力：
如果規范的實驗操作是獲得可靠數據的保障，那么合理的實驗設計則是獲得有意義科研數據的前提。在實驗課教學中滲透科研設計的理念與方法，同樣是實驗課程教學的重要組成部分。而教師引導下的學生科研選題設計、實驗操作方案細化可以作為實驗課程教學的重要補充，以鍛煉和提高研究生科研設計能力。探索以研究生自主選題為核心的分子生物學實驗課程教學模式，將是未來分子生物學實驗課程改革的重要方向。
3結語
