時間:2023-01-08 13:29:40
序論:在您撰寫救火事跡材料時,參考他人的優秀作品可以開闊視野,小編為您整理的7篇范文,希望這些建議能夠激發您的創作熱情,引導您走向新的創作高度。
Abstract: China's fire accidents caused by building thermal insulation material frequently appeared. Civil building exterior insulation system is one of the causes of frequent fire accidents in energy efficiency. How to draw a lesson from the costly and great fire and further improve the fire prevention work of building exterior insulation materials are imminent.
關鍵詞: 保溫材料;現存問題;解決措施
Key words: thermal insulation material;existing problems;countermeasures
中圖分類號:TU5 文獻標識碼:A 文章編號:1006-4311(2014)06-0132-02
0 引言
近年來,隨著我國經濟建設的蓬勃發展,建筑行業也得到了長足的進步,但是在飛速發展的同時,隨之而來的各類建筑工程事故也是層出不窮,安全問題越來越成為我們建筑行業在工程建設中不可忽略的因素。一直以來,火災的發生給人類的生命和財產帶來了很大的損失,企業建筑物施工及使用過程中的防火在建筑防災中越來越受到人們的重視。保溫材料一般是指導熱系數小于或等于0.2的材料。近些年,我國發生的大大小小的火災事件,如2008年的“濟南奧體中心體育館兩次火災”,到北京央視新址火災、南京中環國際廣場火災、上?!?1.15”特別重大火災事故、“沈陽第一高樓”大火等一系列重大火災事故,都是由于外保溫材料使用不當引起的,也是為我國建筑行業在使用建筑外保溫材料上敲響警鐘。
1 事故分析
1.1 事故經過 2011年10月27日下午4點半左右,鄭州市一在建高層居民樓發生火災,發生火災的居民樓工地屬于鄭弘房地產開發有限公司,外墻保溫材料外側美化鋁塑板起火燃燒?;馂陌l生后,消防部門接報后,迅速派出20多輛消防車130余名消防官兵趕赴現場撲救,經過一個多小時的撲救,于6點左右撲滅大火。
經勘查,起火工地屬于鄭弘房地產開發有限公司,具體著火部位為在建天元世家工地3號樓25至32樓東立面,系外墻保溫材料外側美化鋁塑板起火燃燒。過火面積約200平方米。火災未造成人員傷亡。
據統計,去年建筑工地類火災占全市各類火災數量的30%以上,其中建筑可燃易燃保溫材料已成為一類新的火災隱患。在施工過程中,一些開發商和保溫材料生產企業“配合”,拿著合格的阻燃保溫材料進行檢測,施工時卻用易燃的低價產品,這一塊塊易燃保溫板貼在在建住宅外墻上,埋下了安全隱患。
1.2 事故分析
1.2.1 直接原因 經過我們調查分析,在大樓進行裝修施工的時候,主要是由于2名電焊工違規操作,使得短時間內形成火災的。通過這起火災,我們不難看出以下5個方面的問題:①電焊工沒有專業的資格證,嚴重違反操作規程,引發火災后逃離現場;②裝修工程違規建筑,層層分包,導致安全責任不落實;③在施工現場管理混亂,存在明顯的安全落實不完善的現象;④事故現場還使用大量的違規易燃的材料,如尼龍網和聚氨酯泡沫等易燃材料,導致火勢很快蔓延起來;⑤有關部門監管不力,導致安全管理不到位,才會發生此次火災。
由此我們不難看出,引發事故的原因主要有三類,施工組織不合理,建筑材料使用不規范,工程監管不負責。
1.2.2 間接原因 工程中的缺陷,就是由人為的或自然的原因,在建筑物的正常使用過程中出現的種種不足。按照不同程度的現象,我們可以分為以下三類:①輕微缺陷。由于它們并不影響建筑物結構的承載力等完整性,但是卻妨礙地面的不平整、地面混凝土龜裂、鋼板上劃痕等現象。②使用缺陷。雖然不會影響建筑結構的承載力,但是會給人不安全的感覺。而大多是由于施工不合理和建筑材料使用不合理或者偷工減料造成的。③危及承載力缺陷。雖然采用材料的強調不足或者結構件截面尺寸不夠,但是這類威脅到結構的承載力和穩定性不及時消除,就可能導致局部或整體被破壞。
三類缺陷可能是顯露的,如屋面滲透;也可能是隱蔽的,如配筋不足等等在隱蔽部位建筑材料使用的不合理。兩者相比,后者更危險,因為它有良好的外表的假象,一旦有所發展,后果可能很嚴重。
通過上述分析,在造成建筑安全事故的各種因素中,從建筑材料的角度,我們重點關注的是由于建筑材料的問題直接引起的或者與建筑材料相關的各類工程事故。
2 防治措施
2.1 要嚴把消防設計審核關 國家現行消防技術規范 《高層民用建筑設計防火規范》《建筑設計防火規范》等文件中,對建筑材料燃燒性進行分類,對不同等級的易燃燒的建筑材料進行規定,在使用過程中,就需要嚴格遵守規定,從源頭上避免建筑外墻保溫材料火災隱患產生。
2.2 建立多部門聯合監管機制 建立“源頭把關,抽樣送檢,部門協同,全程監管”的機制是有效遏制外保溫系統火災事故的關鍵?!霸搭^把關,抽樣送檢”,就是對外保溫材料的選用通過消防設計審核、審查和抽樣送檢實施監管,嚴把材料的燃燒性能關口;“部門協同,全程監管”,就是協調建設主管部門及其相關業務單位,與消防機構一道對外保溫系統從設計、用材到施工過程進行全方位監管。建筑工程一直都是消防監督檢查工作的重點對象。在專項整治的基礎上,采取切實有效措施,進一步加強消防安全監督管理工作。對未排查的建筑要全面排查,對排查出的隱患要限期消除。通過加強地方立法、制定地方標準、研發推廣新型建筑外墻保溫材料等措施,探索建立加強建筑外墻保溫材料監督的長效機制。
2.3 落實在建工地施工現場防火責任制 組織工程技術和施工人員需要深入熟悉設計圖紙,這樣才能保證在施工過程中的消防安全。就需要編制保溫材料專項施工方案,以此來制定保證工程質量技術措施和安全操作規程的技術文件。而編制專項的消防安全方案,才能保證施工的消防安全。以此來制定實戰演練為基礎的應急預案,達到增強應急意識的目的。以此來落實消防安全的生產責任制,保證各項生產制定的安全進行。針對施工現場用火等現象然后多火災進行合理的預防,以此來督促施工單位對消防安全“四個能力”建設,還要定期加強員工消防安全教育不定期的崗前培訓,使施工人員能夠達到“一懂三會”要求,提高自防自救能力。
2.4 組織開展消防安全專題培訓 為了避免災害的發生,就需要定期對工程項目等負責人開展定期的專題講座等各種宣傳,以此提高相關人員的消防安全意識。通過開展安全知識等培訓,一定程度上能提高管理人員與施工人員的消防安全知識掌握水平,還要積極策劃開展建筑外保溫材料消防安全巡回培訓班、施工人員消防技能比賽等趣味性、實用性、互動性強的宣傳活動,使管理人員與施工人員的消防安全知識掌握水平得到大幅度提升,杜絕火災事故的發生。
3 結束語
火災也是災害的一種,但是和大自然的災害相比較,突出特點就是具有鮮明的經濟特性。我們從消防的安全角度看,降低火災損失的決定性防范效果就是經濟手段。因此,我國市場利益多元化、市場主體多樣化、市場關系等也變得相對復雜,因此就需要完善監管制度。如果標準制度的安排存在不合理的現象,就會使得消防成本低于依法所得,因此有的企業和個人不惜壓力消防成本,鋌而走險,有的甚至違章。我們要從一起起的火災里吸取教訓,除了要完善防火救火的技術層面外,也要提高自身的更深入的思考。
參考文獻:
[1]張樹培.防水材料選用[M].中國建筑防水出版社,1998.
【關鍵詞】防火安全; 防火材料; 材料發展趨勢
中圖分類號:TU998文獻標識碼: A
一、引言
在組成建筑的重要材料之一就是建筑防火材料,其在建筑物中起到十分重要的作用。很多年前的建筑物,由于建筑施工人員防火意識比較淡薄,從而對建筑防火材料的使用不夠重視; 甚至某些施工單位為了獲取利益,減少甚至不使用建筑防火材料。這些由于建筑防火材料劣質、防火裝備不到位造成了人員傷亡和經濟的巨大損失。由此可見,建筑防火材料是建筑物消防建設的一個重要拼圖。本文第一部分對簡單介紹了一般建筑防火材料進,第二部分則對建筑防火材料的發展趨勢進行了預測和分析。
二、建筑防火材料的應用
2.1 輕質新型復合材料
2.1.1 石膏型復合材料
石膏產品質量較輕,具備一定保溫、吸聲的性能,且阻燃性能較好。石膏材料大部分是復合材料,其基體一般是無機質材料石膏。一般的二水石膏是水合物,在發生火災時,二水石膏的結晶水受熱后脫除,在脫結晶水的過程中二水石膏吸收很大的燃燒熱,從而降低燃燒物的表面溫度,且在脫除的結晶水時燃燒物表面容易形成水蒸氣氣幕,起到隔絕氧氣的作用,從而也能起到阻燃作用。形成的無水石膏也是絕熱體和阻燃物。正是由于石膏的優良阻燃特性,其制備的石膏復合材料被廣泛應用于建筑中。
2.1.2 纖維加強型水泥板材
以水泥為基材,添加適當的膠粘劑,在向其中加入石棉或者玻纖,即可制備得到纖維增強型水泥板材。它具備板材厚度較小、板材質量較輕、板材的力學性能優良(抗拉強度和抗沖擊強度高)、耐候性較好和阻燃性能優良等特點,這種材料被廣泛應用于各類墻體及復合墻體方面。
2.1.3 以鋼絲網為芯的復合板材
在鋼絲網上覆蓋輕質板或者輕質混凝土為即可制備鋼絲網型復合板,這種復合板材結合了很多種材料的多種優良特性,其在減薄墻體的厚度和減輕墻體的重量方面起到十分顯著的作用。
2.1.4 金屬基板材及其復合材料
金屬基板材及其復合材料是常見的金屬型防火材料。這種材料耐火性能優良,屬于難燃型材料。
2.2無機輕質防火材料
2.2.1 巖棉和礦渣棉
巖石在高溫處理后即可制成的人造纖維,這種纖維就是巖棉,這種纖維阻燃性能較好及低導熱系數等性能,因此其可被做為一些防火裝備和防火絕熱板材。利用冶金爐中的礦渣制備的纖維為礦渣棉,這種材料具有阻燃性能好、較低的導熱系數等特點。上述兩種纖維在建筑保溫材料方面得到廣泛應用。
2.2.2玻璃棉
玻璃棉也是一種人造纖維材料,其以白云石和蠟石等為原料制成的不燃性材料。玻璃棉具有很多優點,其在建筑防火和保溫材料應用廣泛。
2.2.3 硅酸鋁型纖維
硅酸鋁型纖維是質輕、耐火性優良的人造纖維,是一種新型耐火材料。其制品可在建筑和裝飾材料方面得到廣泛應用。
2.2.4 膨脹型珍珠巖
膨脹型珍珠巖具有輕質、多功能和耐火性優良等優點,其主要以珍珠巖礦石為原材料制備而成,其在建筑保溫、防火和吸聲方面應用廣泛。
2.3 阻燃和自熄滅型泡沫塑料
阻燃和自熄滅型泡沫塑料:自熄滅型PS(聚苯乙烯)發泡材料、阻燃型PS(聚苯乙烯)發泡材料、阻燃型PU(聚氨酯)發泡材料、PVC(聚氯乙烯)發泡材料、脲醛發泡材料等。這些材料在建筑物防火、保溫及裝飾等方面得到廣泛應用。
2.4 板材和砌塊材料
2.4.1 加氣混凝土型輕質材料
加氣混凝土型輕質材料分為砌塊和條板兩種制品。加氣混凝土是以含鈣型材料、含硅型材料制成混凝土型材料,然后加入發氣劑制備而成的材料。其在承重墻體和保溫材料等方面被廣泛應用。
2.4.2 輕質混凝土型材料
利用水泥為主要原材料,對主體材料進行改性或者配方調節即可制成輕質混凝土砌塊和板材,這種產品具有種類和用途多樣性等優點,這種材料主要在保溫、防火、隔聲等方面被廣泛應用。
2.4.3 由粉煤灰制備的墻體材料
粉煤灰墻體材料主要是指粉煤灰型砌塊和粉煤灰空心小型砌塊。通過調節粉煤灰、石膏、石灰等原料的比例或者對原料進行改性即可制成不同類型的粉煤灰型砌塊,其主要應用于工業建筑及民用墻體。通過調節粉煤灰、水泥等原料的比例或者對原料進行改進即可制成的粉煤灰空心小型砌塊,其在建筑中也得到廣泛的應用。
2.4.4 其他類型的阻燃材料
其他類型的建筑阻燃材料包括改性防火型吊頂板、無鹵阻燃型膠合板、耐火級木地板等。隔絕材料表面的氧氣和降低材料表面燃燒溫度是一般防火材料的阻燃機理。當材料中的阻燃劑在火災中遇熱后熔化后,帶走材料表面大量熱量,從而有效的降低防火材料表面溫度;且阻燃劑在材料表面易于形成致密的碳層,這樣起到隔絕氧氣作用;與此同時,材料能產生較多的不可燃性氣體也起到隔絕材料表面空氣的作用。為了有效降低建筑物的火災危險性,阻燃型材料被廣泛應用于裝修建筑內部 [1]。
三、新型防火材料的研發方向
3.1 防火板材技術發展趨勢
新型防火板材的發展方向主要參考環保要求,因此主要有:利用無機物做基體制備復合板材或者采用輕質材料來制備復合板材。在降低建筑器件的成本方面,厚度較薄、質量較輕的防火板越來越受到青睞。
3.2 新型阻燃材料的開發
為了有效確定高分子材料的安全使用,很多研發人員開發了新型的阻燃技術。嚴格的環保規定和阻燃標準對阻燃型高分子材料提出了新的挑戰, 因此阻燃和環保相結合已經成為新型高分子阻燃材料的發展方向[2]。
3.3 防火涂料技術發展趨勢
防火涂料通常是通過加入阻燃劑來實現阻燃作用, 因此防火涂料的發展方向主要有: 調節配方使涂料中多種阻燃劑發揮協同作用;制備具有阻燃效果的催化劑和發泡劑,這樣可以猝滅氧自由基或者形成致密碳層隔絕氧氣;制備無鹵阻燃劑,然后添加到無機防火涂料中,這樣制備的涂料可以達到環保要求。
3.4 防火封堵材料技術的開發
向材料中加入鹵素阻燃劑來增強材料的阻燃性能是大部分阻燃材料進行阻燃實現的途徑,防火封堵材料大部分也是采用這種方式來達到阻燃效果。目前,很多國家出于對環境保護的要求,對燃燒時產生毒性和酸性氣體的防火封堵材料進行了禁止使用的規定,所以制備新型無鹵阻燃助劑已成為全球新型阻燃材料開發的必然發展態勢[3]。
3.5 綠色防火材料的開發
隨著人們對環保要求越來越高,以可循環使用的材料或可再生資源制備綠色防火材料在建筑材料領域發揮著越來越重要的作用,盡量把制備低毒、低煙和無污染性等特性的材料做為創新點。例如近期開發潔凈阻燃型材料, 這種材料具有燃燒時沒有太多煙氣放出且燃燒時沒有濃烈刺鼻的氣體放出,因此為火宅現場的人員疏散逃生創造了有利條件和爭取了時間, 而且在降低起火災方面起到十分重要的作用[4]。
四、結束語
無論是傳統的防火材料或者新型防火材料的開發方面,國內企業與國際先進水平相比差距較大,這即是國內企業需要解決的難題,同時開發成功的新型防火材料也可以給企業帶來十分顯著的經濟效益。因此國內生產防火材料的企業應注重品種、質量、性能的創新,以市場為導向,設計高品質的阻燃產品,從而提高我國防火材料的創新能力和生產水平。同時,由于人們對環保提出越來越高的要求,因此努力開發環?;途G色化新型防火材料。
參考文獻
[關鍵詞]凝膠;泡沫滅火;煤炭自燃;體積半衰期
中圖分類號:TM711.5 文獻標識碼:A 文章編號:1009-914X(2017)12-0392-01
1 引言
凝膠N2泡沫新材料應用中,施工前由施工負責人組織有關人員到施工地點掌握現場情況,參加施工人員應熟知《煤礦安全規程》有關規定。施工前,對該巷道雜物及險段提前進行清理和加固,確保施工安全與施工進度。計劃所需物料、設備全部采用礦車運輸,裝運材料要有專人負責,各種料車均不能超過礦車高度,運送時嚴格遵守有關規定。井下卸運笨重物料、設備時,要相互照應,精力集中,準備攜帶的小型材料和工具要拿穩,確保安全。所需物料、設備到達施工地點后,靠巷幫堆放,要整齊,注膠泵要穩定好,不得影響運輸、通風、行人。采用全風壓通風,特殊情況采用導風或安設風機,保證通風安全。在施工地點安設電話一部,發現異常情況,采取措施進行處理。施工人員要配備必要的勞保用品。
2 注凝膠設備應用技術管理
凝膠N2泡沫新材料應用中,施工專職電工及設備維修工負責施工中電氣設備的安全管理及設備維修。設備接電、撤電,由電工負責,電工必須持證上崗,嚴禁帶電作業。非專職人員不得擅自操作電氣設備,嚴格執行“誰停電誰送電”制度。所有電器設備必須防爆,電纜吊掛整齊,開關上架,并掛牌管理,及時檢修,符合有關規定。工作地點的所有電器設備放在施工地點以里5米處,注膠泵的皮帶傳動部分必須安裝防護罩,確保安全。注膠設備:NJB-1-80型凝膠泵是一種用來輸送凝膠的泵組,它可自動地將水、基料、促凝劑按一定比例混合后,經三個出液口輸送到用膠地點。根據各種材料的配比不同,凝膠混合液可在十幾秒至幾十分鐘內形成固態膠體,用于煤礦直接滅火和堵漏。
3 凝膠N2泡沫滅火新材料應用安全研究
3.1 起動操作
首先檢查機器各緊固螺絲,不得有松動現象。檢查各泵和流量調節器油箱內的油,必要時加入各自的油。泵用油是30~40號機油,變速器用專用的UD油。盤車檢查各泵能否轉動自如。檢查電器開關、起動器。檢查各輸送膠管、接頭和過濾網。將主泵吸水管和溢流管放入配好促凝劑的水箱中;將膠管的吸管和溢流管放入膠料箱(或膠料桶)中。打開混合器出口的3個閥門。待起動正常后再按需要關掉1~2個。任何情況下必須保證有1個閥門全開且暢通。
3.2 注膠過程中的操作
待基料料箱內的基料注完后,可在不停機的情況下快速地把吸料管和溢流管換進另一只基料料箱中,這樣可保持連續注膠。促凝劑箱只需不斷地往料箱中補充材料,不需要來回移動吸料膠管。膠料流量無級調節器只能在泵運轉的情況下調節,嚴禁停機時調節。泵的調壓器是用來限定注膠壓力并防止電機過載的,供貨時已經調好,不要隨意調節。注膠時若發現溢流管有溢流,首先要檢查輸送管和混合器是否堵塞,混合器出口閥門是否打開。一般情況下是不會有溢流的。
3.3 停泵操作
注膠結束后,必須將主泵和膠泵都輸送清水3分鐘以上,并同時將混合器的3個出料閥門都打開,以保證泵內、管內和混合器內沒有混合液和膠料存在。將各泵的吸管從清水箱中拿出,將吸口放在無粉塵和雜物的地方(最好用手拿著),讓泵繼續運轉吸水5分鐘,這樣可將泵內的積水排出。
4 凝膠N2泡沫滅火施工研究
4.1 施工準備
準備兩個0.5m3的鐵箱,用于儲存基料;并準備1個0.6m3(φ0.9m,高度1m)的鐵箱,用于配制促凝劑溶液。將3個鐵箱放置于滅火巷道內的注膠設備附近;配好設備入口管路,并配好設備出口的變頭,使之能與混合器通過25mm的高壓軟管相連;配好混合器出口變頭,使之能與25mm的注膠高壓軟管連接,并準備25mm的注膠高壓軟管10根(10m長的6根,5m長的4根);1寸閥門6個(注膠時接在鉆孔上,鉆孔泄漏時可隨時關閉閥門);準備l寸管(接鉆孔口的l寸閥門)變25mm的高壓接頭(接25mm的注膠高壓軟管)的變頭6個,連接設備出口和注膠鉆孔
根據其它礦的滅火經驗,基料在井下的運輸相當困難,為了便于井下基料運輸,可將基料用汽油桶運至巷道開口處,用泥漿泵將基料通過管道輸送到注膠設備的基料儲存箱;每班按注膠6小時計算,每班注膠量為30m3。井下膠體材料需保證2天的用量,基料量為18t,促凝劑量為7t。地面需保證5天的用量,基料量為45t,促凝劑量為18t;基料的泥漿泵兩臺,流量為3m3/h。并鋪設輸送基料的管路。注膠順序,先注終孔位置較低的鉆孔,再注終孔位置較高的鉆孔,防止因注高位孔時,堵塞低位孔。
4.2 施工步驟
將基料用泥漿泵輸送到基料儲存箱,每班需用泥漿泵輸送基料兩次(共3t),第一次輸送4桶(約1m3,重1.3t),根據注膠設備流量,可使用約3小時,第二次輸送5桶。注膠前先接清水管沖冼每個鉆孔3~5分鐘。將注膠管路連接好(每次連接3個),注膠泵入口管路放入相應的料箱,啟動注膠泵壓注凝膠。待基料料箱內的基料注完后,可在不停機的情況下快速地把吸料管和溢流管換進另一只基料料箱中,這樣可保持連續注膠。促凝劑箱只需不斷地往料箱中補充材料(每3分鐘向料箱內添加1袋),不需要來回移動吸料膠管。隨時檢查各鉆孔的進膠情況,如發現有不進膠的鉆孔,應及時將其拆下,接上清水管沖冼。如有鉆孔從鉆孔周圍向巷道返膠,應先將基料吸液管從料箱中拿出,待注膠管沖冼過后,再關閉該鉆孔的閥門,然后再將基料吸液管放入料箱繼續注膠。待將該鉆孔處理好后,再打開閥門繼續注膠(或接至其它鉆孔注膠)。停止注膠后,再用泵繼續注清水5分鐘,沖冼注膠管路,防止凝膠堵塞高壓軟管。將每班注膠量及注膠情況及時填入現場記錄本,以便下一班查詢,并向防火辦公室匯報。
關鍵詞:血管內皮生長因子VEGF;BMP-2;骨再生
據估計,全世界每年有2.2 萬的骨科、神經外科及口腔科患者因骨缺損行骨移植手術。目前常見的骨移植材料有自體骨、同種異體骨、脫礦化骨基質、異種骨、合成材料、組織工程產品等。自從滅活骨、脫鈣骨能夠誘導異位骨再生的現象被發現以來,科學家們認識到蛋白在誘導骨再生中起到關鍵作用,基于生物活性分子的骨組織工程成為研究的熱點。骨是高度血管化的組織,血管生成對骨再生至關重要。缺乏血管生成會導致骨再生中骨形成和骨總量減少。新生的血管對于營養供應、分子信號的傳輸和干細胞的運輸十分重要。血管生成對骨再生的意義重大,眾多學者嘗試利用促進血管生成的因子與骨再生的因子結合共同促進骨愈合。本研究試圖利用VEGF與BMP-2制備基因活化的仿生生物材料,觀察其對骨缺損的愈合中的促進作用。
1 資料與方法
1.1實驗分組 實驗分為5個組,包括:純殼聚糖/膠原支架,記為G1(group 1);整合BMP-2腺病毒的殼聚糖/膠原支架,記為G2(group 2);整合VEGF腺病毒的殼聚糖/膠原支架,記為G3(group 3);整合BMP-2腺病毒和VEGF腺病毒的殼聚糖/膠原支架,記為G4(group 4);以及整合BMP-2腺病毒和VEGF蛋白的殼聚糖/膠原支架,記為G5(group 5)。
1.2殼聚糖膠原支架的制備及復合病毒 將殼聚糖用0.5mol/L乙酸配成2%(w/v)的溶液,將膠原按2%比例溶解于殼聚糖溶液中,磁力攪拌48h后注入培養皿,4℃ 下放置30min,-35℃放置過夜,最后-80℃放置2h成型后移入冷凍干燥機凍干,48h后干燥完成。支架在接種細胞或病毒前需滅菌,具體步驟如下:先以0.3M NaOH的溶液中和材料中的乙酸,然后75%乙醇浸泡12h,大量PBS沖洗去除殘余乙醇,紫外線照射30min。
將殼聚糖/膠原支架切塊。在無菌操作臺內,將病毒液滴于支架上,使之浸潤,具體量為:對于G2,G3組,1ml 的腺病毒溶液滴到1mg 的干燥的殼聚糖/膠原支架上,4℃ 過夜使支架與質?;蛳俨《境浞纸Y合,然后-80℃放置2h成型后移入冷凍干燥機干燥。對于G4組, Ad-BMP-2與Ad-VEGF病毒液等體積混合后,吸取1ml滴到1mg殼聚糖/膠原支架上,4℃ 過夜使支架與質?;蛳俨《境浞纸Y合,然后-80℃放置2h成型后移入冷凍干燥機干燥。對于G5組,將2mg VEGF-D蛋白溶解于2ml的滅菌的去離子水中,獲得的終濃度為濃度為1mg/ml,將2ml溶液滴于干燥的殼聚糖/膠原支架上,再將1ml 的Ad-BMP-2病毒溶液滴到1mg 的干燥的殼聚糖/膠原支架上,所獲得的支架為每1mg 支架有2mg VEGF蛋白及1mlAd-BMP-2病毒液;4℃ 過夜使支架與質?;蛳俨《境浞纸Y合,然后-80℃放置2h成型后移入冷凍干燥機干燥(圖1示冷凍干燥機及干燥過程)。
1.3整合不同生長因子的支架對骨髓間充質細胞增殖分化影響的相關研究 MTT 法檢測支架材料對骨髓間充質細胞增殖的影響。將五種支架各選4 塊置于24孔板內,第四代骨髓間充質細胞消化后,以1×105 細胞的密度接種于支架,每個支架100μl細胞懸液。3h后添加 150μl 10%FBS 的DMEM培養液繼續培養,分別在1、3、7d 檢測細胞增殖活性。
ALP檢測:接種方法同前,3 h后添加 900μl 10%FBS 的DMEM 培養液繼續培養,分別在7d和14d 檢測ALP活性。具體方法如下:7和14d后,取上清液,80μl的上清加20μl的0.5M的AMP,然后加入100μl底物,混勻后37°孵育1h。取50μl上清,按堿性磷酸酶試劑盒說明書在405nm波長下測ALP活性。根據換算出的每孔細胞的ALP值和DNA的總量的比值來計算每孔細胞的ALP活性,單位是nmoles paranitrophenol/ng DNA/min。
1.4骨缺損修復的觀察 選取 6 只2歲大的中華田園犬,手術在全麻下進行。局部消毒后,拔除下頜前磨牙,清理牙槽窩后,去除牙槽間隔,以得到骨缺損模型。植入種植體,將支架放入近中牙槽窩,縫合。將G1-G5組每組中的一個樣本隨機置于種植體近中缺損區,以保證每只狗都含有5個組的樣本。術后肌肉注射抗生素(40萬單位/ml,0.1ml/kg體重),動物軟食2w。12w時取材,截取下頜骨種植體周圍缺損區骨,低速渦輪機及去離子水沖洗冷卻下分割標本,進行組織學觀察。
2 結果
2.1 材料制備。
2.2通過MTT法檢測支架材料對骨髓間充質細胞增殖的影響。第四代骨髓間充質細胞三維培養于支架材料中后,分別在1、3、7d檢測,每組每個時間點檢測四個樣品。結果顯示(圖2),復合病毒或/和生長因子蛋白的殼聚糖/膠原支架與殼聚糖/膠原材料對骨髓間充質細胞的增殖沒有影響,病毒或/和生長因子蛋白對骨髓間充質細胞的增殖無毒性作用。
2.3 ALP活性是細胞成骨向分化的標記。骨髓間充質細胞在各組復合支架上三維培養時的ALP活性如圖3所示,7d和14d培養后,培養于復合Ad-BMP-2的支架上的骨髓間充質細胞均表現出較高的ALP活性(P
2.4組織學染色 組織學切片觀察種植體周圍的組織形態,圖4可見,種植體周圍均形生成了成熟的骨組織,骨組織中均有新生成的血管。定性觀察發現,G3與G4組新生成的血管較其他組高,G2,G4及G5組的骨生成多于G1,G3組,以G5組最高。
3 討論
骨缺損修復是復雜的生理過程,一般涉及到細胞遷移、增殖與分化以及骨重建[1]。通常骨形成可通過兩種不同的方式:假如骨斷端是固定的,或者在發育階段顱面部骨形成過程中,在將要形成骨的部位間充質前體細胞直接分化為骨細胞成骨,成為膜內成骨;若發生在有動度骨折斷端間,或者發育過程中的長骨和腰椎,則先形成軟骨稱之為軟骨化骨。新生血管提供營養和氧氣的供應,同時為血液循環中的間充質細胞提供途徑到達缺損區,以及增加骨細胞的增殖分化而起作用,在骨折愈合的初期十分重要 [2]。VEGF是主要的血管生成因子[3]。它在出生后的血管生成起到重要的作用。VEGF對肥厚性軟骨結構和血管化都十分重要。眾多研究發現,VEGF 單獨不能促進成骨[4,5],已有研究證實VEGF與BMPs聯合使用能促進細胞存活率[6],誘導成骨細胞增殖與分化[7],以及促進骨細胞遷移[8],通過這種方式促進了骨的再生。眾多學者在動物模型中聯合應用VEGF 與BMP-2促進骨再生,總的來說,大多數因子的聯合使用較單獨使用能增加成骨,單獨使用VEGF 不足以促進成骨,聯合使用VEGF能促進骨再生中的血管再生,這與本研究結果一致。有研究指出,在骨折愈合中,血管發生發生在成骨之前[9]。因此,開發一種模擬內源性基因釋放的這種呈時間特異性表達的基因控釋系統對骨組織工程意義十分重大。
由于VEGF在骨再生中有多種作用, VEGF除了促進成骨細胞的存活,它還能誘導血管再生。VEGF刺激內皮的增殖與遷移,并參與祖細胞的招募及分化為內皮細胞[10,11]。高劑量的VEGF已被證實能導致血管通透性的增加,并在骨再生中誘導產生大量的非生理性的內皮細胞管腔[12]。
研究者已經成功復合了殼聚糖/膠原支架。對于復合支架來說,殼聚糖的加入能降低細胞介導的收縮率,即在培養細胞的過程中,復合材料的收縮度比單純膠原支架的收縮率小,材料的機械性能有所增強。細胞在復合支架中更容易黏附,生長并增殖。分析是因為膠原成分的加入在四個方面提高了材料的細胞相容性:其一,降低了復合材料的孔徑,增大了材料的細胞容積;其二,增大了復合材料的吸水性,使細胞在支架中更容易交換營養與代謝物;其三,膠原本身可作為細胞營養的來源;其四,降低了材料的降解性能,使細胞更容易滲透到支架內部生長繼而引發進一步的支架降解??偟膩碚f,本實驗制備了一種基因控釋支架,通過冷凍干燥法使生長因子與腺病毒結合,腺病毒介導的外源性基因能高效表達,在缺損區局部釋放,避免了腺病毒導致的免疫反應,在骨再生中具有潛在的應用前景。
參考文獻:
[1]Carano RA, Filvaroff EH. Angiogenesis and bone repair. Drug Discov Today 2003;8:980-9. [2]Asahara T, Takahashi T, Masuda H, et al. VEGF contributes to postnatal neovascularization by mobilizing bone marrow-derived endothelial progenitor cells[J]. EMBO J,1999,18:3964-3972.
[3]Peng H, Wright V, Usas A, et al. Synergistic enhancement of bone formation and healing by stem cell-expressed VEGF and bone morphogenetic protein-4[J]. J Clin Invest,2002,110:751-759.
[4]Peng H, Usas A, Olshanski A, et al. VEGF improves, whereas sFlt1 inhibits, BMP2-induced bone formation and bone healing through modulation of angiogenesis[J]. J Bone Miner Res, 2005,20(11):2017-2027.
[5]Samee M, Kasugai S, Kondo H,et al. Bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) and vascular endothelial growth factor (VEGF) transfection to human periosteal cells enhances osteoblast differentiation and bone formation[J]. J Pharmacol Sci,2008,108:18-31.
[6]Byrne AM, Bouchier-Hayes DJ, Harmey JH. Angiogenic and cell survival functions of vascular endothelial growth factor (VEGF)[J]. J Cell Mol Med,2005,9:777-94.
[7]Wang, D.S., Miura, M., Demura, H. & Sato, K. Anabolic effects of 1,25-dihydroxyvitamin d3 on osteoblasts are enhanced by vascular endothelial growth factor produced by osteoblasts and by growth factors produced by endothelial cells[J]. Endocrinology,1997,138: 2953-2962.
[8]Mayr-Wohlfart U, Waltenberger J, Hausser H, et al. Vascular endothelial growth factor stimulates chemotactic migration of primary human osteoblasts[J]. Bone,2002,30:472-477.
[9]Sojo K, Sawaki Y, Hattori H, et al. Immunohistochemical study of vascular endothelial growth factor (VEGF) and bone morphogenetic protein-2, -4 (BMP-2, -4) on lengthened rat femurs[J]. J Craniomaxillofac Surg,2005,33:238-245.
[10]Winet, H. The role of microvasculature in normal and perturbed bone healing as revealed by intravital microscopy[J]. Bone,1996,19: 39S-57S.
以小班幼兒生活區游戲活動――舀的工作為例,探索材料的層次性投放的實踐研究。教師在區域中提供給幼兒練習舀的材料,其中發生的故事值得我們解讀、反思和調整。
玩具簡介:
“舀豆子”是一個投放在小班生活區的低結構玩具。
材料投放:兩個大容器、大小不同的勺子、彈珠。
玩具的玩法:讓孩子學會使用勺子,從裝有彈珠的容器中將彈珠一個個舀到另一個空容器中,鼓勵幼兒盡量把彈珠全部轉移干凈,并且保證彈珠不滾落出容器和勺子外。
一、基于觀察的第一次材料投放
(一)觀察案例
案例一:暢暢彩棒圈珠子
最近兩次活動中,暢暢都游蕩在各個區域間,看看這個,瞧瞧那個,就是不愿意進去玩,盡管老師引導了,她還是一個勁搖頭,最終在好朋友的邀請下,選擇生活區“舀珠子”的工作。她拿起勺子在小碗里將珠子從這個碗舀到旁邊的空的小碗里,沒過多一會兒,她就開始東張西望,已經對舀珠子的游戲沒有了興趣。看見旁邊的琪琪正在進行小彩棒搭建的活動,暢暢忽然興奮起來,她拿起小勺子,舀起碗里的彈珠,放到琪琪用小彩棒搭的格子里,咕嚕咕嚕彈珠滾到了地上。怎樣才能讓珠子固定不滾動?在反復嘗試了多次,最終,她們用小彩棒搭了完整四邊形珠子被圈住了。當時,誰也沒有想到好辦法,但這也為接下來的游戲埋下了有趣的伏筆,為彈珠找家成為了“熱門話題”。
案例二:欣欣送珠子回家
這天,我好奇看著欣欣在低著頭,弓著腰,小心翼翼在不停擺弄著,并隨著小珠子的滾動,還發出“哎呀哎呀”的嘆息聲,只見她拿起勺子看看,好像在琢磨著什么,又在放勺子的盤里,看看這個勺子,看看那個勺子,終于選好自己想用的勺,即:欣欣一個勺把短并且凹面深的勺子。再次拿起心儀的勺子,欣欣一次就將彈珠放進瓶蓋了,她激動地從小椅子上跳了起來,喊道:“我送珠珠回到了家了”!原來欣欣一直在做珠子和瓶蓋顏色對應的游戲。
(二)案例解讀
關鍵詞:東張西望、彩棒、短且凹面深
1.東張西望:舀珠子雖然是一個低結構的材料,但是,由于教師提供的材料品種的單一,如:僅提供彈珠作為舀的材料,孩子對機械、重復、單一的活動已經不感興趣,東張西望。真正吸引孩子的是有趣、多變開放性操作的材料,要給孩子提供更多嘗試、創作、想象的空間。
2.彩棒:暢暢選擇小棒表明在孩子與玩具互動中,能夠自己自發選擇材料,對游戲有濃厚的興趣,有創新游戲的能力,同時也迫切需要教師多種材料的支持其深入的探究。
3.欣欣能夠根據自己的能力認知,對教師提供的多種材料,加以調適和選擇。教師可以根據幼兒的能力投放材料,也可以適度增加超出或降低其能力的材料投放,這樣符合《指南》中60%孩子能達到設定目標,而另外超出能力的20%或低于能力20%的孩子,我們應提供更多材料供孩子選擇。
如何在原有的基礎上持續吸引幼兒的學習興趣,又能對幼兒的能力有一定的促進,這讓我更關注孩子們游戲中的變化。
(三)材料支持策略:關注幼兒興趣、支持他們自主游戲。
關鍵詞:兩個維度 舀的工具、舀的內容
第一維度:舀的工具 進一步豐富舀的工具,首先可以從勺的變化中給予支持,如勺把長短變化、勺面深淺變化、勺材質的變化。讓孩子通過實踐操作感受舀的工具多種變化,激發幼兒探索新的玩法吸引幼兒的興趣。
第二維度:舀的內容 提供多種材料進一步煉幼兒手眼協調能力及手部的控制力,提供大小、形狀各異的顆粒物,如珠子、豆子、鈴鐺。也可以提供粉末狀如面粉、包谷糝舀出容易兩個面,還可以提供多種材料:泡沫塊、小鐵塊等。進一步練習幼兒的精細動作,增加游戲的難度。
二、基于觀察的第二次材料投放
(一) 觀察案例:
案例一:孫嘉逸在玩舀水工作
在舀水的工作,孫嘉逸拿了一個瓶子、拿起大勺子滿滿舀了一勺水,低著頭身體慢慢移動著,小心翼翼地往漏斗里到,但總是把水灑在桌上、地上,試過幾次后,水還是灑在桌上,他環視著周圍,試圖在尋找著什么,耷拉著腦袋撅著小嘴 ,他想放棄游戲。
案例二: 晨晨在玩舀水工作:
晨晨先拿了一個瓶子,大口深的勺子,舀起滿滿一勺水,也出現了的問題,水灑的到處都是,咦!怎么回事,只見他拿起小勺子,三指捏住,又看看自己一把抓拿著大勺子,噢明白了,晨晨臉上露出微微的笑容。大勺子也用三指捏辦法,這樣試試好多了,反復練習幾次后他成功了。不過這次在舀的材料和形式都有了新的變化,水桶里多了一些大小形狀不同的積木、雪花片、乒乓球,這些玩具漂浮在水面上,不僅增添游戲的難度,也使操作活動更有趣味性。晨晨選用小勺子,很自如把漂浮物都舀了出來,臉上露出了成功的喜悅。
(二)案例解讀
關鍵詞:三指捏、平移提升、少量多添、豐富材料
1三指捏:晨晨從開始一把抓的拿勺方式,到通過自我調整,自己借鑒已有的經驗和技能,調適為三指捏勺的方式,最終獲得游戲的成功。
2.平移提升:舀液體對孩子有了更高的要求。勺子舀水后先慢慢平移到瓶底處,再自然向上提升到瓶口處,最后傾斜勺子倒水。這一系列的動作對孩子手部協調性及控制能力有了較高的要求。
3.少量多添:案例中幼兒舀滿滿的一勺水,出現了水灑在桌上、地上,通過控制舀水的量進行自我調適,采用少量多添的辦法操作,達成了通過主動操作提高幼兒動手能力和手眼協調能力的學習目的。
4.豐富材料:孫嘉逸放棄游戲,反映出可供幼兒選擇的材料不足。先提供寬口瓶、大口深的勺子,降低了游戲的難度。待舀的技能有了一定基礎后,再選擇窄口瓶進行嘗試。晨晨通過自我調適動作完成游戲,選擇舀水里的漂浮物,用新的材料進一步練習手眼的協調能力及手部的控制力。在同一年齡段投放不同難度的材料,這樣既滿足幼兒的一般發展需要,又滿足了個別幼兒特殊發展需要,讓缺乏自信的幼兒看到成功,讓已成功的幼兒不斷看到新的方向。
(三 )材料支持策略:關注幼兒能力,適時調整材料投放
關鍵詞:兩個維度舀出容器、舀入容器
第一維度:舀出容器的變化 借鑒烏鴉喝水的故事,我思考從舀出容器本身的變化,增添游戲的難度 。如:原來盛物的容器小桶幼兒容易操作,為不斷滿足幼兒探索的欲望,改變舀出容器,提供窄口且深瓶子,幼兒在操作中不斷嘗試探索舀的方式。這樣不僅增添游戲的難度,也使操作活動更有趣味性。
第二維度:舀入容器的變化 增加材料難度。如:將舀出的水倒在礦泉水的瓶蓋上,增加游戲難度,進一步鍛煉幼兒手眼協調能力和腕部的小肌肉的控制力。如:舀的是面粉,對幼兒有了更高的要求,倒入啤酒瓶時,不僅要控制好倒的速度,還要控制好勺子傾斜的角度。
三、基于^察的第三次材料投放
(一)觀察案例
案例:運水游戲
我們將舀水的游戲活動,從室內轉移到室外,從個人獨立游戲演變成小組合作的運水游戲,游戲要求小組合作把大盆里的水運到對面的盆里,比一比哪組運的又快又好。
比賽開始,孩子們都用小碗、小杯、瓶子運水。石沐欣用小桶舀水后發現大盆里的水一下少了很多,她像發現新大陸似地說:“凱凱,快!你也去拿小碗舀水,晨晨我們一起抬起來?!毙佬浪麄兡脕砹诵∨?、用口杯、小碗往小桶里舀水……在大家齊心協力下,水很快就剩一點了,再怎么辦呢?容容拿來了漏斗,把漏斗套在礦泉水瓶里,用勺子往瓶子里舀水。石沐欣著急地說:“這樣太慢了,我們把大盆抬起來把水倒在瓶子里。幾個孩子抬起大盆,“不好水灑在外面這樣不行,還是用勺子舀吧”凱凱著急的大聲喊道?!荣惤Y束了,石沐欣這組獲得了第一名,孩子們高興得跳起來。
(二)案例解讀:
1.目標能夠引導合作
小班幼兒以獨立操作游戲為主,幼兒的交流合作較少。教師在設計“運水”游戲時,提供了各種能舀水材料,游戲的目標用不同的材料鍛煉幼兒舀液體能力。以比一比哪組運的又快又好為游戲規則,激發幼兒合作的愿望,讓幼兒嘗試合作帶來的樂趣。
2.材料能夠促進合作
在玩“運水”的游戲中,提供了大小不一的舀水用具、一大盆水怎樣又快又好的運完,簡單的問題復雜化,增加了活動的難度,幼兒不能獨立完成任務,迫使他們合作共同完成,在其中幼兒間多了一些分工、協商、配合的機會,使合作成了一種需要、一種必然,從而激發幼兒合作的欲望。
(三)材料支持策略:關注同伴間的材料,培養合作意識
關鍵詞:兩個維度 水量的變化、多元化的材料支持
第一維度:根據水量的變化 選用不同操作材料。游戲剛開始,大盆里的水量比較多,孩子們都用小碗、 瓶子運水。水量變少了怎么辦?針對孩子在游戲中出現狀況,給幼兒提供一些新的材料支持,較小的舀的工具,如瓶蓋、小杯子、小勺子。支持幼兒互相合作快速、干凈的將盆里的水舀干凈,從而完成游戲目標。
【關鍵詞】 組織型纖溶酶原激活因子(t-PA);包被Dacron;PTEE;表面血小板
近年來的很多研究表明[Lin TL,Lu FM,Sheu MS. Antimicrobial coatings: A remedy for medical device-related infections. Med Dev Tech,2001],在由生物材料引發的感染(biomaterial centered infection,BCI)中,45%的原因是因為生物材料與人體接觸時,血液和組織中的纖維粘連蛋白(fibronectin)、玻璃粘連蛋白(vitronectin)和纖維蛋白原(fibrinogen)會吸附在材料表面,形成一層蛋白膜,而細菌很容易在這層蛋白膜上黏附,繼而生長繁殖,逐漸形成一層頑固的水合多聚糖性質的生物活性膜(biofilm)[1]。這層生物膜可以吸收營養物質,具有一定厚度,產生很強的抗藥能力,傳統的抗菌治療是無法根除的。根據細菌性感染的機理,本文就t-PA對生物材料表面血小板黏附的作用及影響進行初步探討。
1 實驗材料與方法
1.1 材料和儀器 滌綸(Dacron)B型(蘇州華明織帶有限公司),膨體聚四氟乙烯(PTEE,美國Gore&Associates公司)。谷胱苷肽硫基轉移酶(Glutathione-S-trasferase,GST)和GST-t-PA融合蛋白由實驗室制備,液體培養基(法國生物梅里埃公司)。
1.2 材料的包被 將Dacron和PTEE薄膜剪裁成96孔酶標板等大的原片,用蒸餾水充分漂洗干凈后在70%的酒精中浸泡30min,無菌條件下取出、晾干,置入96孔板中,每種材料分成3組,每孔分別加入100μl含0.5mg/ml GST-t-PA的Tris-HCl緩沖液(pH8.0)或含0.5mg/ml GST的Tris-HCl緩沖液或單純的Tris-HCl緩沖液,4℃放置過夜,棄去上清液,用Tris-HCl緩沖液(50mM Tris-HCl,pH8.0/120mM NaCl)輕輕漂洗兩次移入新的96孔板孔中備用。
1.3 材料植入動物模型的制作 2.5~3.0kg雄性新西蘭大耳白兔72只(武漢大學醫學院動物實驗中心),隨機分為3組(各組24只):空白對照組,GST蛋白組和GST-t-PA蛋白組,每組又分為兩組,D組(放置Dacron片)和PEET組(放置PEET片)。
動物稱重后,2%戊巴比妥鈉(35mg/kg)耳緣靜脈麻醉動物,備皮消毒后沿股動脈走向切開皮膚,分離出兩側的股動脈和股靜脈,結扎股動脈的側枝循環,經股靜脈注射肝素(10U/kg體重),5min后從兩端夾閉股動脈,其間間隔不小于6cm,用眼科剪剪開0.3cm左右的縱口,用生理鹽水將血管內的血液沖洗干凈,然后放入經GST蛋白或GST-t-PA蛋白包被處理的兩種滌綸材料膜片,空白組進行手術后血管縫合,不予以任何處理。用3-0聚丙烯線縫合血管,移去動脈夾使血流再通,密切觀察手術處股動脈搏動情況。麻醉恢復后,正常飼養。于術后第2天,每組隨機選8只行血小板沉積實驗。
1.4 血小板在材料表面黏附的觀察(體外實驗) 取空白組新鮮兔動脈血,按9∶1的比例與3.8%的枸櫞酸鈉溶液混勻,離心分離富含血小板的血漿,用PBS將血小板數目調節至106/ml,取150μl加到上述處理的材料表面然后于37℃放置30min,棄取血漿,用PBS將材料膜片輕輕漂洗3遍后用2.5%的戊二醛固定2h,經冷凍干燥后進行掃描電鏡觀察。隨機選取6個視野進行血小板計數。
1.5 對機體內血小板黏附的觀察(在體實驗) 在植入物后2天,各組8只動物按前述方法麻醉,常規分離提取血小板,于血小板懸液內逐漸滴加Cr51鉻酸鈉溶液18.5MBq(0.5mCi)。將51Cr標記的血小板懸液2ml經股靜脈注入體內,1h后取出移植材料,用PBS輕輕沖洗,并置于γ記數井中記數,同時抽取全血標本確定以確定游離和細胞51Cr活性,測定血小板計數和凝血酶原時間(PT)。
2 結果
2.1 血小板在材料表面黏附的觀察(體外實驗) 結果顯示,用t-PA重組蛋白及GST蛋白處理醫用Dacron及PEEP片,可明顯抑制血小板在其表面的粘附,對Dacron片,用GST包被使其表面的血小板數目比對照組減少了大約42.3%(P<0.01);而TFPI重組蛋白處理組的血小板粘附數目減少更為明顯,與對照組相比減少了大約76.4%(P<0.01)。在聚氯乙烯材料的實驗中,也得到了類似的結果,其中GST處理的材料表面的血小板數目比對照組減少了大約34.1%(P<0.05);TFPI重組蛋白比對照組則減少了大約74.8% (P<0.01)。在兩種材料的實驗中GST組與TFPI重組蛋白組之間相比都有明顯的差異(P<0.05) (見圖1)。
2.2 在體實驗中機體內血小板沉積的影響 在體實驗研究表明,Dacron組中,GST-tPA組血管血小板沉積明顯少于GST組和空白對照組載體組和空白對照組,(P<0.05);PEEP組也得出相同的結論。見表1。
1 Conarweron JW,Stewart PS,Greenberg EP. Bacterial biofilms. A common cause of persistent infections. Science,1999,284:5418.
2 Tang L,Sheng Y. The mechanism of device-centered infection. Thans Soc Biomater ,1998,24:7.
3 Lijuen HR,Collen D.Strategies for the improvement of thrombolytic sgents.Throb Haemost,1991,66:88-110.
4 Collen D,Lijnen HR. Thrombolytic agents. Thromb haemost,2005,93(4):627-630.