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建軍節的習俗一:擁軍活動八一建軍節的習俗主要是個機關部門和社會團體開展形式各樣的擁軍活動。
每年建軍節,部隊都組織盛大的紀念活動,慶祝自己的節日。各級政府,也組織隆重的軍民聯歡晚會或座誡會,邀請老、軍隊離退休干部復員退伍軍人、革命傷殘軍人及烈軍屬代表參加。同時,還要組織擁軍優屬活動,宣傳人民軍隊的光榮傳統,檢查優撫工作的落實情況。發現問題和困難及時給予解決。
建軍節的習俗二:墓祭奠英雄人物在這一天,全軍將會舉辦各種活動來慶祝他們自己的活動。有的在部隊舉辦文藝演出,展示他們的才能;有的則到社區訪問孤寡老人,為他們獻上一份親情般的溫暖;而有的則會到革命烈士陵園掃墓或者進行網上祭奠,以此來紀念那些為革命、為人民獻出寶貴生命的英雄人物。
進行網上祭奠,以此來紀念那些為革命、為人民獻出寶貴生命的英雄人物。
在八一建軍節這天的掃墓活動中,不像清明節時的嚴肅和莊重,他們一般會在碑墓前舉行一些紀念活動,與其說是表示對革命先輩悶得的崇敬與懷念,倒不如說是為了紀念他們的功績和對當下幸福生活的珍惜。祭奠時的程序和清明節掃墓差不多,一般會有打掃、供奉水果佳肴,或植樹、獻花圈、致禱詞等,隨后有的軍人部隊還會去拜訪先烈們的家屬,從活著的人那里聆聽教誨。與進行實地紀念不同的時,在科技發達的現今社會,他們還可以通過互聯網進行網上祭奠,這也是未來掃墓祭奠活動的必然趨勢。
建軍節的習俗三:看望慰問老同志走訪慰問軍隊離退休老同志老干部,向他們致以節日的問候和良好的祝愿。
為他們送上節日的問候,對軍隊老同志們在革命戰爭年代所作出的貢獻以及長期以來對地方經濟社會發展的關心支持表示感謝,祝愿他們健康長壽、晚年幸福、合家歡樂。
關鍵詞:秸稈;纖維素降解細菌;篩選;酶活性;產酶條件
中圖分類號:Q939.96;X712 文獻標識碼:A 文章編號:0439-8114(2013)05-1121-04
Screening of Cellulose-Degrading Bacteria and Optimization of Enzyme-Production Conditions
WANG Shuang,XU Jie,LI Xi-yuan,XIANG Ying,PAN Yang-nan,XIA Tian
(Taizhou Institute of Science and Technology, Nanjing University of Science and Technology,Taizhou 225300, Jiangsu, China)
【摘要】 細菌總數快速檢測在質量監測中具有重要的意義,目前除了經典的平板培養法以外,還有微菌落法、阻抗法等快速檢測方法,這些方法或者需要較長的檢測時間,或者需要較高的檢測成本。本研究提出一種不需要培養而在濾膜上直接計數的細菌總數的快速檢測方法,它主要分為過濾、染色、顯微鏡計數和計算四個步驟。計算細菌總數時,根據細菌在濾膜上的分布特點,對傳統公式進行改進,提出按區域計算細菌總數的計算方法,提高了檢測精度。研究結果表明,該方法與傳統的平板培養法無顯著性差異(t=0.847,P=0.436>0.05),是一種低成本、快速的細菌總數檢測方法。
【關鍵詞】 細菌總數;檢測;直接計數;濾膜;染色
Abstract:Rapid detection of total bacteria number is very important in quality control. Now, there are many rapid detection methods of total bacteria number, such as microclony method, bioelectrical impedance method and so on, besides the plate counting method. But these methods need more time or higher cost. So we presented a new method, observing directly on the filter without germculture, it included four steps, filtration, coloration, observation and calculation. Based on the point of distributing, a new formula was put forward other than former formula, so it improved the detection precision. The results reveal that there are no significant differences between the new method and the plate counting method (t=0.847, P=0.436>0.05 ), and it is a lower cost and faster detection method of total bacteria number.
Key words:Total bacteria number; Detection; Observing directly;Filter;Coloration
1 引 言
細菌總數計數的研究已有很多,目前國標規定的方法為平板計數法,該方法是將樣品加入瓊脂營養基,在37 ℃下培養24~48 h后計數。這種方法精度高,但耗時長,難以滿足實際工作需要。為了簡化檢測程序、縮短檢測時間,國內外學者進行了大量的快速檢測方法的研究,提出了阻抗檢測法[1]、Simplate TM全平器計數法[2]、微菌落技術[3-5]、紙片法[6-7]等檢測方法,取得了一定的成果,但檢測時間仍在4 h以上。
本研究在分析了已有研究成果的基礎上,提出了在濾膜上染色后,直接計數的細菌總數檢測方法,具體步驟為:用集菌儀進行細菌收集在膜上進行染色在油鏡下計數按公式計算出菌液濃度。實驗結果表明,該方法與傳統的平板培養法無顯著性差異,檢測時間約1 h,是一種快速的細菌總數檢測方法。
2 材料與方法
2.1 材料
本研究中用的試驗材料有集菌儀(杭州泰林生物技術設備有限公司),染色劑,生物顯微鏡(寧波永新光學股份有限公司),聚碳酸脂膜(直徑47 mm)。
2.2 實驗方法
2.2.1 準備工作 卸下集菌儀的濾網(見圖1),統計濾網上小孔總數,為計算菌液濃度做準備。另外,還需對集菌儀中的集菌器進行高壓滅菌,以防止過濾過程中引入外源細菌。
2.2.2 細菌收集 取一定濃度的霉菌菌液300~500 ml,裝在集菌儀上,集菌儀采用蠕動加壓方式對菌液施加一定的壓力,使菌液流過孔徑為0.45 um的聚碳酸脂膜。采用過濾方法是因為它可以使細菌相對均勻地分布在濾膜上,而選用聚碳酸脂膜是因為這種膜具有良好的透光性,便于用顯微鏡觀察。
2.2.3 染色 集菌后取下濾膜,切下一部分放在載玻片上,進行染色、固定。染色的目的是增大細菌與背景的對比度,便于觀察。
2.2.4 顯微鏡計數與計算 菌液經集菌儀過濾后,細菌在濾膜上的分布見圖2、圖3,由圖可以看出細菌分布具有以下兩個特點:一是細菌集中在一個個的圓形區域內,這些圓形區域和擋板的小孔相對應;二是各個圓形區域之間細菌很少。根據膜上細菌分布的這種特點,提出以圓形區域為單位進行計數,統計出圓形區域內細菌的平均個數,從而計算出菌液中細菌總數。具體步驟如下:隨機選擇10個圓形區域,在油鏡下,調節焦距以獲得較清晰的圖像(見圖4),統計每個圓形區域內的細菌個數,然后按公式(1)計算出菌液的濃度。
X=A10×N/V(1)圖2 膜上細菌的區域分布
Fig 2 The distributing region of bacteria on the filter(100倍)
圖3 膜上細菌的區域間隔
Fig 3 The space among the distributing regions(100倍)
圖4 膜上細菌染色后圖像
Fig 4 Figure of bacteria after coloration(1 000倍)
式中:X表示待檢菌液濃度(CFU/ml)
A表示10個圓形區域內細菌總數
N表示濾網上小孔總數
V表示集菌時所用待檢菌液體積(ml)
3 結果與討論
3.1 實驗結果
按上述方法計算得到的結果與平板培養法得到的結果見表1。表1 兩種方法得到的細菌總數
Table 1 Total bacteria number by two different methods
樣本1樣本2樣本3樣本4樣本5樣本6染色鏡檢
(cfu/ml)185168157165171166平板培養
(cfu/ml)176155165158183152
對表1中兩組數據進行配對t檢驗,在α=0.05時,雙尾檢驗結果如下:t=0.847,P=0.436>0.05,說明兩種方法得到的結果無顯著性差異。
3.2 討論
3.2.1 計算公式的改進 用集菌儀對樣本菌液進行過濾時,由于濾網擋板的作用,使得細菌不是均勻地分布在整個濾膜上,而是集中分布在濾網的小孔處,所以,計算細菌總數時,不能采用公式X=A40×Φ1Φ22/V(其中Φ1,Φ2分別為濾膜直徑和視野直徑),該公式是微菌落方法檢測細菌總數中的常用計算公式。在本實驗中,根據細菌分布的特點,提出以圓形區域為單位計算細菌總數的思路,使計算結果更接近真實值,從而提高了檢測精度。
3.2.2 細菌大小的影響 細菌大小對本實驗的影響主要體現在鏡檢時,如果細菌太小,顯微鏡計數時不能將細菌從背景中分辨出來,我們的實驗結果顯示,不能分辨大腸桿菌和葡萄球菌,而較大的霉菌可以清晰地分辨。
3.2.3 檢測時間進一步縮短 細菌總數的經典檢測方法是平板培養法,得到的結果精度高,但是它所用時間長,為了縮短檢測時間,出現了微菌落法,將檢測時間縮短為4 h左右[3-5]。本研究不對細菌進行培養,而是在膜上染色后直接用顯微鏡計數,最大限度地縮短了檢測時間,使整個檢測時間在1 h左右。
4 結論
本研究用集菌儀將菌液過濾后,取濾膜一部分進行染色、制片,然后在油鏡下統計細菌個數。根據細菌在濾膜上的分布特點,提出將圓形區域作為統計單位,得到圓形區域內細菌的平均個數,從而計算出菌液濃度。實驗結果表明,按照該方法得到的結果與平板培養法的結果無顯著性差異。與平板培養法和微菌落法相比,該方法不需要細菌培養,檢測時間只需要1 h左右,明顯縮短了檢測時間,是一種快速、有效的細菌總數檢測方法。
參考文獻
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關鍵詞:溫泉;嗜熱細菌;熱穩定纖維素酶;分離;鑒定
中圖分類號:q939.9;q93-331 文獻標識碼:a 文章編號:0439-8114(2014)07-1516-04
isolation and identification of thermophiles degrading cellulose in hot spring
mei fan1a,1b,lin bai-xue1a,zhao chao1a,1b,liu bin1a,1b,2
(1a.college of food science;1b.institute of bioenergy, fujian agriculture and forestry university, fuzhou 350002, china;
2.china national engineering research center of juncao technology, fuzhou 350002, china)
abstract: culture-based approach was used to isolate thermophiles from hot spring. in total, 27 thermophilic bacterial strains were isolated from hot springs in nevada of usa and yongtai hot spring in fujian province of china. superior cellulose and hemicellulose decomposing strains were screened and identified by 16s rdna. the results showed that ly7 and ly8 degrading cellulose were indentified as alicyclobacillus sp. ly7 and geobacillus sp. ly8. geobacillus sp. ly8 could be cultured at temperature ranging from 40 ℃ to 70 ℃, with the optimal temperature of 65 ℃. the β-glucosidase activity of ly8 was 145 iu/ml.
key words: hot spring; thermophiles; thermostable cellulase; separation; identification
纖維素酶是一類能夠將纖維素降解為葡萄糖的多組分酶系的總稱。根據酶的功能差異分為三類:①內切葡聚糖酶(ec 3.2.1.4);②外切葡聚糖酶(ec 3.2.1.91);③β-葡萄糖苷酶(ec 3.2.1.21)[1,2]。纖維素酶降解纖維素是酶系各組分之間協同作用的結果。首先由內切葡聚糖酶在纖維素分子內部非結晶區進行隨機的酶切產生小分子的纖維素,然后由外切葡聚糖酶以纖維二糖為單位從纖維素線性末端進行水解,每次切下一個纖維二糖分子,最后由β-葡萄糖苷酶將纖維二糖以及短鏈纖維寡糖水解成葡萄糖[3-5]。
嗜熱菌是一類能在45 ℃以上生長和繁殖的極端環境微生物,包括部分細菌、古菌和真菌三大類,通常分布在地熱環境和人工高溫環境中,如溫泉、地熱區土壤、深?;鹕娇?、深海熱液區以及高溫堆肥、熱水器等環境[6]。嗜熱菌產生的熱穩定酶具有耐熱性、高效性以及對有機溶劑、去污劑和變性劑的較強抗性,在食品、醫藥、生物質能源、生物工程及廢物處理等方面都得到廣泛的應用[7]。其中,熱穩定的纖維素酶在纖維素的轉化中有著重要的應用價值。研究表明,許多高溫菌具有分解纖維素的能力,如芽孢桿菌屬(bacillus)、梭狀芽孢桿菌屬(clostridium)、脫硫腸狀菌屬(desulfotomaculum)、熱酸桿菌屬的解纖維素熱酸桿菌(acidothermus cellulolyticus)、喜熱菌屬(caloramator)的厭氧和分解纖維素高溫菌na10菌株[8]。由于高溫有利于纖維素的降解,而高活力熱穩定的纖維素酶更是纖維素酶研究的重要內容。因此,研究采用純培養的方法從溫泉樣品中篩選出能降解纖維素的耐熱性菌株并進行了16s rdna鑒定,為在常溫條件下獲得有價值的熱穩定性強的酶奠定了基礎。
1 材料與方法
1.1 材料
溫泉樣品:大盆地溫泉和大沸泉,溫度42.5~97.0 ℃,取自美國內達華州;42~70 ℃溫泉樣品,取自福建福州永泰。菌株escherichia coli dh5α為福建農林大學食品科學學院實驗室保存。
1.2 試驗方法
1.2.1 嗜熱細菌的分離 將泥樣和水樣混合均勻后,以500 r/min離心2 min,去除大顆粒的雜質,然后以10 000 r/min離心10 min,獲得菌體沉淀。水樣可以直接利用。處理后的樣品分別置于4 ℃冰箱和-70 ℃超低溫冰箱。取處理好的樣品加適量無菌生理鹽水稀釋,取1
00 μl涂布于zobell 2216e或者tim改良后的tm固體培養基上,置于不同溫度的電熱恒溫鼓風干燥箱中培養。挑取單個菌落進行劃線分離,反復分離至單一菌落。 1.2.2 嗜熱菌全菌蛋白分析 將提取純化得到的嗜熱菌全菌蛋白進行sds-page凝膠電泳,挑選具有不同電泳帶型的嗜熱菌菌株進行復篩。
1.2.3 降解纖維素嗜熱菌的篩選 將純化得到的嗜熱菌分別點種于纖維素篩選平板上,置于合適的溫度下培養1~2 d。用0.1%剛果紅染色0.5 h,再用1 mol/l nacl溶液脫色0.5 h,挑選有透明圈的菌落,測量透明圈直徑,進行初篩。復篩采用液體發酵培養基,于120 r/min下培養36 h,測定發酵液酶活[9,10]。
1.2.4 16s rdna基因序列的pcr擴增和鑒定 用細菌基因組提取試劑盒提取嗜熱菌基因組dna,再進行pcr擴增,將回收后的16s rdna片段與pmd18-t vector 在16 ℃連接過夜,再轉化至e. coli dh5α中。將提取得到的質粒經hind ⅲ限制性內切酶和bamh i限制性內切酶在37 ℃反應3~4 h,取適量酶切產物于1%瓊脂糖凝膠上電泳,分析插入片段的大小,確定克隆是否成功[11]。
1.2.5 序列比對和系統發育分析 陽性克隆的測序由北京天根生物科技公司完成。核酸序列相似性分析采用美國國家生物技術信息中心(national center for biotechnology information, ncbi)提供的比對搜索工具blast(basic local alignment search tool, blast)進行搜索(http://ncbi.nlm.nih.gov/blast/)。用clustal x(1.83)進行序列比對,采用mega構建系統發育樹。
2 結果與分析
2.1 嗜熱菌的分離純化和菌株分型
每個樣品經過處理后,涂布于嗜熱菌分離培養基zobell 2216e或者tim改良后的tm固體培養基上,分別在53 、60 、65 、70 、85 ℃下進行培養。經過多次劃線分離純化得到27株嗜熱菌菌株。
部分嗜熱菌的菌落形態如表1所示。已純化的嗜熱細菌菌株采用甘油法保存于-70 ℃冰箱。
采用嗜熱菌全菌蛋白的sds-page凝膠電泳(圖1)對27株嗜熱菌進行初步篩選。挑選具有不同電泳帶型的嗜熱菌菌株進行下一步的研究。
2.2 降解纖維素嗜熱菌的篩選與鑒定
2.2.1 產纖維素酶嗜熱菌的篩選 采用剛果紅染色法從永泰溫泉篩選到兩株具有較強纖維素降解能力的菌株ly8和ly7,對這兩株菌株的形態進行觀察,并進行鑒定。
2.2.2 產纖維素酶嗜熱菌的形態特征 兩株菌株都是桿狀、有芽孢的革蘭氏陽性菌,菌落均是白色。ly7沒有鞭毛,ly8有鞭毛(表2)。
2.2.3 降解纖維素嗜熱菌的酶活活性 纖維素酶根據酶的功能的差異可分為三類:內切葡聚糖酶(eg),外切葡聚糖酶(cbh),β-葡萄糖苷酶(bgl)。如圖2所示,ly8內切葡聚糖酶活性高達145 iu/ml。
2.3 降解纖維素嗜熱菌的鑒定
2.3.1 產纖維素酶嗜熱菌的16s rdna鑒定 將ly7和ly8接種液體培養基,65 ℃培養36 h后離心收集菌體,用細菌基因組提取試劑盒提取這兩株嗜熱菌的基因組dna。用細菌通用引物euba27f和euba1492r進行16s rdna 的擴增,擴增產物大小約1 500 bp,結果見圖3。
將純化回收的16s rdna pcr產物與pmd 18-t 載體連接,轉化e. coli dh5α,雙酶切驗證后(圖4)送北京天根生物科技公司測序。
2.3.2 序列比對與系統發育分析 ly7和ly8的16s rdna測序結果表明,菌株ly7的16s rdna為1 531 bp,菌株ly8的16s rdna為1 552 bp。用blast在ncbi中搜索同源序列進行比較分析,結果(圖5)顯示,菌株ly7屬于脂環酸芽孢桿菌屬(alicyclobacillus),菌株ly8屬于土芽孢桿菌屬(geobacillus),生長溫度為40~70 ℃,最適溫度65 ℃。
3 小結與討論
本研究以纖維素為底物,從美國內達華州溫泉和中國福建永泰溫泉分離得到兩株產纖維素酶的嗜熱細菌菌株ly7和ly8,它們的最適反應溫度為65 ℃,而目前文獻中報道的纖維素降解菌株最適溫度為30 ℃左右,因此本研究篩選的菌株可在很多工業和生物技術領域得到廣泛應用。嗜熱細菌ly8的酶活最高,其內切葡聚糖酶活性最高達145 iu/ml,與文獻報道的產內切葡聚糖酶活性較高的幾株菌株(綠色木霉c-08最高酶活為89 iu/ml[12]、里氏木霉40359最高酶活100 iu/ml[13])相比,可知嗜熱細菌ly8內切酶活性最高。雖然目前工業上纖維素酶產生菌trichoderma reesei工程菌mcg80發酵酶活為300~500 iu/ml[14],但嗜熱細菌ly8
為一株野生菌株,酶活能夠達到這個水平,說明很有應用前景,如果再通過誘變育種很可能成為一個生產菌株,而且其可在高溫范圍降解纖維素,有著常溫細菌不可比擬的優勢。通過16s rdna序列鑒定,ly8屬于土芽孢桿菌屬(geobacillus),ly7屬于脂環酸芽孢桿菌屬(alicyclobacillus)。由于真菌降解纖維物質主要是通過分泌大量的胞外酶來進行的,因此纖維素降解真菌在纖維素酶的開發和應用上具有細菌、放線菌等所不具有的優勢。然而,本研究的細菌體內存在著獨特的耐高溫代謝途徑和耐高溫酶,如果通過分子生物學方法克隆這些耐高溫酶的基因,并使其在畢赤酵母等真菌宿主中進行表達,就可以在常溫條件下獲得有價值的熱穩定性強的酶,因此具有極高的研究和應用價值。
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關鍵詞 細菌性食物中毒 檢驗 影響因素
doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2009.20.168
影響因素
采集樣品缺乏及時性:由于一些消費者對《食品衛生法》觀念淡薄,缺乏自我保護意識,發生食物中毒后,不能首先及時向衛生監督部門報告疫情,而是自己與經營者私自交涉,在不能如愿的情況下才向衛生監督部門舉報,因此造成一些經營者在知道發生食物中毒的情況下,首先處理掉一切可能的剩余食品,對加工經營現場、工具、容器進行了消毒和處理,延誤了有效的報告時間,從而影響了對可疑食物的采集[1]。
采集樣品缺乏代表性:由于食物中毒是突發公共衛生事件,細菌性食物中毒都有特定的潛伏期,毒素性中毒一般有1~3小時,細菌性中毒一般6~10小時。當衛生監督部門接到疫情報告趕赴現場時,往往時間周期較長,可疑食物已被清理,即使采到幾份剩余食品,也可能不是食物中毒當天餐桌上的剩余食物,因此常出現食品中檢出的細菌與病人排泄物中檢出的細菌不相符,影響了中毒結果的分析。另外,食品加工、制作現場能提供線索的環節已被經營者清掃、消毒,食具和用具已被清洗干凈,同樣也影響了食品加工工具、容器、場所的采樣和檢驗。
采集樣品缺乏典型性:中毒病人發病后,患者一般自行服用抗菌類藥物,嚴重時才到醫院就醫。由于一些醫務人員對食物中毒報告制度不夠了解,導致了只管用藥治療,忽視了對病人嘔吐物、排泄物的留取,導致了大量的抗生素抑制了致病菌的繁殖,從而影響了致病菌的檢出率。
采集樣品缺乏完整性:一般中毒病人發病期的血樣容易采到,而采集病人恢復期的血樣,由于病人的不配合或提前出院往往采集不到,也影響了檢驗結果的全面分析。
采集樣品缺乏真實性:食物中毒的采樣應該實事求是,如果剩余食品已不存在,食品加工環境現場已被破壞,則應把檢測重點放在中毒患者的樣品方面,而有些食品經營者自行送一些與食物中毒無關的樣品,故意掩飾自己的過失。
對 策
加強行政管理措施:大力普及《食品衛生法》,加強對食品生產、經營者和從業人員的衛生法制教育,嚴格食品衛生管理和消毒制度。炎熱高溫季節在規模較大的酒宴上,對供應熟、鹵制品,冷葷涼拌菜等高危食品,應建立24小時留樣制度,以備食物中毒危險因素的檢驗鑒定和檢測監督。對不具備熟食、鹵菜加工和衛生設施者應依法給予取締,保障消費者的身體健康。加強《食品衛生法》宣傳力度,普及食品衛生相關知識,使全民懂得用法律保護自己,在食物中毒發生后應及時向衛生監督部門舉報,使衛生監督部門能在最早的時間里對事故進行調查和取樣,以獲得最佳的檢驗結果。衛生監督部門要加強與衛生醫療單位的聯系,醫療機構要組織醫務人員學習有關的衛生法規,在工作中要認真執行食物中毒報告制度,一旦發生食物中毒有關的疫情,應及時上報衛生監督部門,對因食物中毒而引起腹瀉的病人進行診療前應盡量做到先留取樣品再行治療[2]。
保證樣品采集質量:①衛生檢驗人員應準備好細菌性食物中毒檢驗的采樣器材(滅菌采樣容器、運送培養基、無菌棉簽、采血針筒、無菌試管等),應與現場監督人員共同深入現場、分析食物中毒的原因,及時全面采集有效樣品(剩余食品、嘔吐物、排泄物、病人血液、廚具、盛裝食品的容器和加工食品工作臺面的涂擦物、肛拭等),保證檢驗樣品的數量和質量。②采集病人發病期和恢復期的雙份血樣,檢測其抗體效價,對確診食物中毒致病原因可提供科學依據,同時也可排除食品、大便和環境中檢出的其他病原菌[3]。③采集盛裝食品的容器、冰柜內壁及加工食品操作臺面涂擦物,對未能采集到剩余食品時其檢出的致病菌,也可作為食物中毒的間接依據。如果在廚房貼板、冰箱內壁樣品中分離到的致病菌和病人樣品中分離到的致病菌相同,也可作為食物中毒的依據。
提高致病菌的檢出率:①對所有樣品進行致病菌分離和鑒定時應按照國家標準檢驗方法和已公認的微生物檢驗程序進行,應用直接分離及增菌雙重培養,直接分離可檢出樣品中的優勢菌(包括一些條件致病菌),增菌可將樣品中污染的但與菌量較少的致病菌檢出,同時對服藥患者肛拭樣品中被抗生素抑制的細菌達到復蘇和增加菌量的作用。②由于多種病原菌引起的食物中毒,都有類似的臨床癥狀,因此對致病菌的檢測范圍應該擴大,在分離培養時應多準備一些各類細菌的選擇性培養基,采取多思路、多方法同時檢測各種致病菌的原則,從而獲得滿意的、真實的檢驗結果[4]。
討 論
衛生監督部門也經常會接到此類突發公共衛生事件疫情報告和群眾的舉報,通過對患者的個案調查、流行病學分析、現場衛生學監督檢查、實驗室檢驗,查明中毒原因,綜合分析是否為一起細菌或毒素性食物中毒。由此可見,實驗室能否及時、準確、快速地出具檢驗結果對查明中毒原因,具有舉足輕重的作用。它可以為食物中毒事件的確定和為現場采取有效行政控制措施提供科學依據。而采樣是保證檢驗結果準確性和影響檢出率高低的關鍵環節。
參考文獻
1 趙英華.食物中毒調查處理的影響因素及對策.中國公共衛生管理,2003,19(2):116-117.
1.擁軍活動
八一建軍節的習俗主要是個機關部門和社會團體開展形式各樣的擁軍活動。
每年建軍節,部隊都組織盛大的紀念活動,慶祝自己的節日。各級政府,也組織隆重的軍民聯歡晚會或座誡會,邀請老、軍隊離退休干部復員退伍軍人、革命傷殘軍人及烈軍屬代表參加。同時,還要組織擁軍優屬活動,宣傳人民軍隊的光榮傳統,檢查優撫工作的落實情況,發現問題和困難及時給予解決。
各級政府、廣大人民群眾歷來把開展擁軍優屬活動作為紀念建軍節的“保留節日”。中學團組織可以在建軍節前后積極組織各種形式的擁軍優屬活動,通過“軍營一日”體驗人民軍隊嚴明的紀律,嚴格的要求,嚴謹的作風,全心全意為人民服務的精神;通過帶領中學生為軍烈屬上門服務,感受軍人和軍人家庭為祖國和人民安寧作出的犧牲和奉獻,培養中學生的國防意識和長大保衛祖國的公民責任感。
2.祭奠英雄人物
在這一天,全軍將會舉辦各種活動來慶祝他們自己的活動。有的在部隊舉辦文藝演出,展示他們的才能;有的則到社區訪問孤寡老人,為他們獻上一份親情般的溫暖;而有的則會到革命烈士陵園掃墓或者進行網上祭奠,以此來紀念那些為革命、為人民獻出寶貴生命的英雄人物。
在八一建軍節這天的掃墓活動中,不像清明節時的嚴肅和莊重,他們一般會在碑墓前舉行一些紀念活動,與其說是表示對革命先輩悶得的崇敬與懷念,倒不如說是為了紀念他們的功績和對當下幸福生活的珍惜。祭奠時的程序和清明節掃墓差不多,一般會有打掃、供奉水果佳肴,或植樹、獻花圈、致禱詞等,隨后有的軍人部隊還會去拜訪先烈們的家屬,從前輩的人那里聆聽教誨。與進行實地紀念不同的時,在科技發達的現今社會,他們還可以通過互聯網進行網上祭奠,這也是未來掃墓祭奠活動的必然趨勢。
總之,建軍節的節日習俗多種多樣,但最重要和最有意義的當屬祭奠活動了。
3.看望慰問老同志
走訪慰問軍隊離退休老同志老干部,向他們致以節日的問候和良好的祝愿。
為他們送上節日的問候,對軍隊老同志們在革命戰爭年代所作出的貢獻以及長期以來對地方經濟社會發展的關心支持表示感謝,祝愿他們健康長壽、晚年幸福、合家歡樂。詢問老同志們的身體、生活狀況,并希望老同志們一如既往地支持我市的各項工作,為經濟建設和各項社會事業的發展建言獻策。
也希望老同志們把市委、市政府的關懷轉化為動力,全力支持地方經濟社會發展,為社會經濟平穩發展發揮自己的優勢。
4.為貧困家庭獻愛心
【關鍵詞】計算機;素質教育;應用
一、提高教員自身素質是素質教育的關鍵
作為軍校的教育工作者,自身素質得不到較大提高,學員的素質提高就困難、緩慢,只有高素質的教員才有可能培養出高素質的學員。在計算機教育中實施素質教育,提高教員自身素質要先行。首先,教員要徹底轉變教育理念,充分意識到計算機教育是全面培養學員素質的一門重要學科。其次,要不斷豐富計算機專業知識和綜合文化知識,以完成對學員專業技能的培養,進而全面發展學員的其它素質。最后,要具有改革創新精神,并且勇于改革創新,革除舊的教育思想,才能真正將素質教育融入計算機教學,建立起相應的素質教育運行機制并全面推行,培養出高素質的合格士官人才。
二、激發學員課堂學習熱情,增強主動學習能力
軍校的教學軍事色彩濃重,制式化規范化使學員學習起來很容易困倦,所以教員要以豐富多彩的形式和新穎的方法激發并保持學員的學習興趣和求知欲望。興趣、動機、意志、情感,這些非智力因素對認知過程起著始動、維持和調節的功能,它在學員的學習過程中如果受阻或中斷,抑制或減弱,就會導致認知活動無法向縱深發展而緩慢進行,認知活動能力水平不能充分發揮出來,從而影響學員學習效果。例如一個智力因素良好但缺乏學習興趣的學員是不可能取得優良的學習成績的??梢?,教學的各環節中要始終注意創設能夠調動和發揮學員的非智力因素,使其保持學習主動性、積極性。具體做法是:1.激發學員的學習動機。教員要發揮特長開動腦筋,使學員產生內在的學習需求,使其具有明確的學習目的和正確的學習態度。2.激發學習熱情。愛因斯坦說過:“把學生的熱情激發起來,那么學校所規定的功課,就會被當作一種禮物來接受”。就士官學員的心理特征和年齡來看,正處于心理和身體生長發育期好奇心比較重,一般說來對他們學習起主要作用的很大程度上是興趣,因此,在教學過程中,教員有一個非常重要的任務就是培養學員的興趣。這就要求教員在問題的引入和講解的設計上多用心思。根據計算機學科的特點,教員還可以向學員介紹計算機知識在日常生活、科技領域的應用,結合教學的相關內容來解決實際的問題,讓學員知道計算機在作戰以外的實用性,從另外一個角度來激發學員的學習熱情。3.激發學習情感。要重視情感在學生發展中的作用。以情促知,以知導行,情知行互獲,三者相結合,取得最佳的教學效果。4.培養學習習慣。教員要指導學員學會學習,并逐步養成自主學習的習慣,形成自主學習的能力,這樣才能產生學習的積極性。
三、從“教會學員計算機知識”轉向“教會學員學習計算機知識”
計算機是一門操作性很強的學科,要針對計算機學科的特點,注重培養學員實踐動手的操作能力。教員在做演示講解時,要注意引導學員有目的地觀察,認真觀察操作步驟,理清操作步驟,嚴格按操作規則操作,但不是對知識的復制,更應該創造性地解決操作問題?,F代的戰爭是信息化戰爭,每個戰士都應該掌握計算機操作的知識,但戰爭又是講究配合、提倡合作。一個不懂得合作而單打獨斗的人,是不能完全適戰爭需要的。在計算機領域,更是如此。從Windows操作系統到網絡數據庫,計算機上用到的軟件,很少只是依靠一個人的力量編寫出來的。因此,在計算機實際教學中,更應該培養學員合作意識與戰友相互配合的態度。
四、給學員創造充分發展智力因素的自主學習空間
教員講一步操作方法,學員模仿操作一遍的講解實習法,嚴重地束縛了學員的手腳和制約了學員的思維方式,使學員處于被動接受知識的狀態,訓練技能也是被動的,不利于發揮學員的主動性和積極性,無法使學員智力、個性得到充分發展。而自主操作模式采用問題教學法,通過實習任務來組織教學,推進教學的進程。利用新奇的啟發性的問題去激發學員的求知欲和操作興趣,為學員創造了一個充分發展其觀察力、理解力、分析力、記憶和想象力的自主學習的良好空間。引導學員通過積極的創造思維去解決問題,在解決問題的活動中發展學員的智力,提高學員獨自發現問題、分析問題和解決問題的能力。
五、實施素質教育應積極開展課外活動和技能競賽