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【關鍵詞】地基下沉墻體裂縫浸水
一、工程概況
某辦公樓于2007年3月7日正式施工，2007年8月26日竣工，9月18日投入使用。平面呈“一”字形布置，東西朝向，為2層砌體結構，層高為3.2m，總建筑面積為1667.1m2。該樓采用鋼筋混凝土條形基礎，地基處理采用條形基礎下局部換填碾壓墊層，墊層為500mm厚3：7灰土墊層，換填墊層下為素土夯填，是從大砂溝河道層起分層夯填到現有地坪，夯填厚度約8.0m；基礎混凝土強度等級為C20，梁、板、柱混凝土強度等級為C25，墻體±0.000以下為M5.0水泥砂漿砌筑MU10機制磚，墻體±0.000以上為M5.0混合砂漿砌筑MU10機制磚。
2007年11月，該辦公樓北出口進行河道綜合治理、道路拓建，由于工程需要，進行了大砂溝的開挖及必要的降水施工。此時，辦公樓場地出現地面塌陷，地基下沉，護坡、圍墻、辦公樓墻體出現裂縫等。隨著最近雨水增多，該場地及辦公樓的病害進一步加劇，嚴重影響到建筑物的正常安全使用。為此，受使用方委托，我單位對該辦公樓地基下沉、墻體裂縫進行檢測鑒定。
二、檢測結果
（一）、地基檢測
該辦公樓場地是從大砂溝河道層起，分層回填到現有地坪的，回填厚度約8m，回填土層下的河道地層為本場地的軟弱下臥層。
在距建筑物外墻1m范圍內共布置了2個探孔，挖至灰土墊層底面。檢測結果表明：該樓基礎為鋼筋混凝土條形基礎，基礎下為灰土換填墊層，由于散水下回填土含水量比較大、局部飽和呈淤泥狀，探井中出現積水現象，造成探井無法繼續往下開挖，未對灰土墊層厚度和外延寬度進行檢測。
（二）、條形基礎檢測
1、該樓基礎為鋼筋混凝土條形基礎，條形基礎埋深為1.2～1.3m，其外邊緣距離外墻為0.75～0.77mm，厚度為0.15～0.16m。
該樓±0.000以下墻體砌筑磚的抗壓強度等級均為MU10，滿足設計要求。大部分砌筑水泥砂漿強度等級大于M5，基本滿足設計要求。條形基礎表面較平整、砂漿飽滿、灰縫均勻，局部砌筑存在灰縫不均勻、砂漿不飽滿缺陷。地圈梁現齡期混凝土強度推定值為26.9MPa，滿足設計要求。
從進行混凝土強度檢測的構件看，大部分構件表面較平整、無蜂窩、麻面等缺陷，地圈梁未發現裂縫。
2、基礎頂面上回填土檢測：通過對2個探孔開挖，發現該建筑物條形基礎頂面回填土土質均勻，局部含有少量建筑垃圾。在開挖深度范圍內，回填土含水量較大，下部呈淤泥狀，開挖探井中有積水，積水呈泥狀，無臭味。由于回填土呈淤泥狀，無法對該回填土采用環刀法取樣進行了密實度檢測。對素土進行了含水率檢測，素土的含水率為26.2%~33.5%。
3、散水檢測：該室外散水寬均大于1. 5m，室外散水做法自上而下為100~160mm素混凝土(部分散水進行二次澆筑厚度約50mm)，寬度大于1.5m；180～300mm灰土墊層，灰土拌和均勻。散水變形縫填充物脫落，大部分出現斜向裂縫及縱向裂縫。
4、室外地坪：建筑物周圍室外地坪都進行了混凝土硬化處理，從地坪表面看，該場地地坪出現了下沉現象，部分室外混凝土地坪出現了裂縫，裂縫寬度一般為2～10mm，部分混凝土地坪在伸縮縫處出現裂縫及錯位現象，裂縫寬度為12～60mm。因該場地整體下沉，導致該樓西側圍墻上的排水口高于現室外地坪標高，場地雨水無法排出，大量淤積在室外地坪，繼而滲入地基。
5、圍墻及護坡：圍墻為240mm厚磚砌圍墻，高約2.2m，每隔5.7m設置一個磚墩，部分圍墻上出現1～7mm的豎向裂縫，西南角部位裂縫最為嚴重，西側圍墻產生向西位移，頂部向西側向位移175mm，底部向西側向位移128mm。辦公樓西、南側護坡采用塊石砌筑，高度約6m，護坡西南角出現較嚴重裂縫，裂縫寬度3～65mm,局部塊石有松動，西側護坡最大向西位移115mm。護坡其它局部部位也有微小裂縫。南側護坡底部有兩道污水管出口，西側護坡底部有建筑垃圾、塊石、生活垃圾堆積，有塊石護坡施工痕跡。
6、沉降觀測
以該樓一層窗戶的窗臺作為沉降觀測基線，進行了相對沉降觀測，檢測結果表明，該樓相對沉降量較大，該樓地基相對沉降檢測結果詳述如下：
（1）、從地基下沉的部位來看，東北角重、西南角輕，東側重、西側輕的特點。
（2）、從地基下沉相對數值來看，該建筑物最大相對下沉在3～4/F處。如以該建筑物6～7×A軸線窗臺為零點，東側3～4×F相對下沉92.5mm，東北角相對下沉84mm，東南角相對下沉41mm，西南角相對下沉3mm，西北角相對下沉16.5mm，最大相對沉降差為92.5mm，最大局部沉降差為39mm，最大局部傾斜率為6.1‰，遠超過《建筑地基基礎設計規范》GB50007-2002有關規定。
需要說明的是，建筑物窗臺水泥砂漿抹面的標高參差不平，施工誤差較大，對計算相對沉降值會帶來一定誤差。
（二）、上部結構檢測
1、承重砌體結構檢測：該樓墻體砌筑磚平均回彈值為30.14～37.43MPa，最小回彈值為27～28MPa，經回彈法檢測的墻體砌筑多孔磚強度等級均大于MU10。砌筑砂漿強度檢測結果表明，該樓承重墻體砌筑砂漿的強度未達到M5。墻體砌筑磚、砌筑砂漿外觀質量：在可見墻體表面的構件中，大部分墻體表面平整，灰縫厚度均勻，砂漿飽滿，局部砌筑豎縫砂漿不飽滿及砂漿強度偏低。
2、抗震構造措施檢查：該工程場地抗震設防烈度為8度，設計基本地震加速度值0.20g。該樓平面布置呈“一”字形，布置較規則，層數為兩層，總高度為7.8m,層高為3.2m,房屋最大高寬比0.61，橫墻最大間距7.2m，抗震構造措施滿足《建筑抗震設計規范》GB50011-2001的要求。
3、構造柱：采用回彈法對構造柱混凝土抗壓強度進行了檢測，構造柱現齡期混凝土強度推定值為15.5～26.9MPa，所檢測的個別構造柱現齡期混凝土強度不滿足設計要求。從進行混凝土強度檢測的構件看，構件表面平整、密實，個別部位存在蜂窩、麻面、粗糙等缺陷。通過對抽檢的構造柱截面尺寸測量，截面尺寸在260～290mm之間，符合設計構造柱截面尺寸240×240mm的要求。
4、圈梁；采用回彈法對圈梁混凝土抗壓強度進行了檢測，按單個構件進行混凝土強度評定，該樓圈梁現齡期混凝土強度推定值為25.4～30.2MPa，所檢測的圈梁現齡期混凝土強度滿足設計要求。從進行混凝土強度檢測的構件看，構件表面平整、密實。
5、現澆梁：采用回彈法對現澆梁柱混凝土抗壓強度進行了檢測，按單個構件進行混凝土強度評定，該樓現澆梁現齡期混凝土強度推定值為25.9～28.1MPa，所檢測的現澆梁現齡期混凝土強度滿足設計要求。從進行混凝土強度檢測的構件看，構件表面平整、密實。通過抽檢的2道現澆梁截面面尺寸測量，滿足設計現澆梁截面尺寸的要求。
6、傾斜觀測：本次檢測，在該樓四角分別布置了測點，該樓相對傾斜觀測結果表明：該樓傾斜規律與地基下沉基本一致。該樓墻體頂點向東側向位移10～20mm，向北側向位移4～8mm，最大頂點側向位移20mm，最大傾斜率為3.13‰。檢測結果表明：該樓傾斜未超出《民用建筑可靠性鑒定標準》GB 50292-1999中要求。
需要說明的是，建筑物四角墻面抹灰垂直度有一定的誤差，對傾斜觀測結果有一定的影響。
7、裂縫檢測
（1）、裂縫的特點和規律
本次裂縫檢測為現狀檢測。該樓裂縫的檢測結果表明，該樓裂縫具有如下特點和規律：①、從裂縫出現的部位來看，該樓外墻重、內墻輕，二層重、一層輕等特點；②、從裂縫類型來看，有斜向裂縫、豎向裂縫和水平裂縫，且主要為斜向裂縫；③、從裂縫開展程度來看，裂縫寬度一般為0.2～3.0mm，最大裂縫寬度為5mm；④、從出現裂縫的構件來看，在墻體開裂較嚴重部位的圈梁、現澆梁未出現裂縫，該樓一、二層部分樓地面出現了裂縫，一層開展程度較重，部分窗間墻墻體出現貫通裂縫，裂縫寬度一般為1～2.5mm。
（2）、墻體的裂縫情況：該樓C軸、F軸縱墻主要為橫向、斜向裂縫，斜向裂縫方向由南向北傾斜，裂縫寬度為0.2～3mm；F軸外縱墻在二層3軸處兩側出現了八字形裂縫。B×8～1軸線內縱墻主要為斜向裂縫，裂縫開展數量較少，主要集中在5～8軸墻段，裂縫方向為由南向北傾斜，裂縫寬度為0.2～1.0mm，B軸北側墻體出現少量斜向裂縫，裂縫方向為由北向南，寬度為0.1～0.5mm；A軸線外縱墻主要為斜向裂縫，裂縫方向為由北向南傾斜，裂縫寬度為0.2～2mm。內橫墻裂縫較少，一般為橫向、斜向裂縫，大部分斜向裂縫方向由西向東傾斜，裂縫寬度為0.2～1.0mm,二層較多；一層3×C～F后砌的內橫墻產生橫向裂縫，最大裂縫寬度為5mm。
(3)、其他構件：經檢查，未發現圈梁、構造柱、現澆梁裂縫，個別樓板、一層地面有縱、橫向裂縫，裂縫寬度為0.5～2mm。
（4）、墻體裂縫原因分析
該工程墻體裂縫按其形成的原因，大致有以下幾種類型：
①、地基下沉裂縫：該工程墻體裂縫，絕大部分為地基下沉裂縫。此種裂縫主要發生在外墻的斜向裂縫、縱橫墻墻體交接處的豎向裂縫，是典型的因地基產生不均勻下沉的裂縫。
②、應力集中裂縫：此種裂縫主要發生在門、窗洞口部位，一般在門洞上部和窗洞口的角部。由于上述部位是墻的薄弱部位，在洞口角部易產生應力集中，則易產生應力集中裂縫。
③、溫度裂縫：此種裂縫主要發生在頂層山墻、屋面女兒墻處，多數呈水平裂縫，少數為斜向裂縫。由于外界溫度變化，屋蓋與砌體互相約束，造成相互間溫度變化不協調，導致砌體產生溫度應力，溫度應力超過砌體的抗拉強度或抗剪強度極限值時，產生溫度裂縫。
（三）、圍護系統檢查：從目前的現狀來看，該工程屋面防、排水基本完好，無嚴重滲漏現象；部分墻體有開裂現象，部分抹灰層有剝皮現象；部分門窗因地基不均勻下沉，已出現輕微變形；該樓室外地面均已做硬化處理，但地坪存在下沉、開裂、倒坡、變形縫未有填充物未等病害。
五、建筑物檢測鑒定結果評定
（一）、地基基礎：該辦公樓場地具有軟弱下臥層，辦公樓鋼筋混凝土條形基礎、地基相對沉降量較大，地基最大相對沉降差為92.5mm，最大局部沉降差為39mm，最大傾斜6.1‰，變形較大；地基浸水，散水下回填土呈飽和狀態，軟塑，影響地基承載力。從地基變形、地基承載能力、沉降穩定趨勢幾方面分析，按照《民用建筑可靠性鑒定標準》GB 50292-1999的規定，該樓地基基礎應評為Cu級，即安全性不符合國家規范的要求，顯著影響整體承載，應采取措施。
（二）、上部結構：該辦公樓施工質量基本能夠滿足設計要求，但由于地基不均勻下沉該樓墻體出現了不同程度的地基沉降裂縫、應力集中裂縫，最大裂縫寬度已達5.0mm，影響了承重墻體的整體性，對整體結構的抗震不利。按照《民用建筑可靠性鑒定標準》（GB 50292-1999）的規定，綜合判定該工程上部結構應評為Bu級，即安全性略低于國家規范的要求，尚不顯著影響整體承載，對個別構件采取措施。
（三）、圍護系統：該所辦公樓散水、室外地坪已產生裂縫，引起雨水通過裂縫浸水，嚴重影響了該樓地基承載力，不滿足現行國家規范規定。按照《民用建筑可靠性鑒定標準》GB 50292-1999的規定，綜合評定該樓圍護系統應評為Cu級，即安全性不符合國家規范的要求，顯著影響整體承載，應采取措施。
綜合以上檢測鑒定結果，該辦公樓評為Csu級，即建筑物的安全性不符合《民用建筑可靠性鑒定標準》GB 50292-1999對Asu級的要求，顯著影響整體承載，應采取措施，且可能有少數構件必須立即采取措施。
六、辦公樓地基下沉、墻體裂縫原因分析
根據對該建筑物現場環境的踏勘、使用情況的調查，了解到以下情況：
（一）、該辦公樓場地是從大砂溝河道層起，分層回填到現有地坪的，回填厚度約8m，回填土層下的原河道地層為本場地的軟弱下臥層。當河道開挖、抽水等會引起軟弱下臥層的變形，導致該樓場地地面下陷、護坡裂縫。
（二）、該樓西面護坡外緊貼著一道排洪明溝（大砂溝），該建筑物高出大砂溝床面約6m，據調查2007年11月市區北出口道路拓建施工單位在進行大砂溝河道施工時，在離大沙坪派出所護坡約2m處，開挖長15m、寬3m、深2m的溝槽進行河道圍堰施工。
（三）、2008年2月，河道施工單位在離辦公樓護坡約20m處的大砂溝再次開挖深達6m、寬4.5m溝槽，為便于施工，抽排溝槽內地下水。
（四）、該辦公樓東側1.5～5.2m處為新修公路，辦公樓與公路之間人行道未進行硬化施工，且人行道施工面低于公路，雨水直接浸入辦公樓前人行道土層中。
（五）、現場開挖發現，該辦公樓散水下回填土含水量比較大、局部飽和呈淤泥狀，且探井中出現積水現象。
（六）、2007年11月，由于院內地坪下沉造成化糞池開裂，雨水、污水不能正常排泄。
根據現場檢測結果并結合以上幾方面因素綜合分析，引起該辦公樓地基下沉、墻體裂縫的主要原因是地基土浸水濕陷所致，其浸水水源主要為辦公樓東側為新修公路雨水、場地地面水沿地面裂縫滲入；而場地地面裂縫主要是開挖河道施工時，降水引起場地軟弱下臥層變形，并造成靠近河道一側的排水管道及化糞池下沉、排水管接口漏水，場地浸水濕陷，造成混凝土地面斷裂，場地地面排水不暢，雨水絕大部分都是通過地面裂縫滲入地基土層的。
引起辦公樓場地出現地面塌陷、護坡、圍墻出現裂縫的主要原因則是河道開挖、抽水等施工引起場地軟弱下臥層的變形所致；次要原因是辦公樓東側為新修公路雨水、場地地面水沿地面裂縫滲入等。
七、結論及建議
（一）、檢測鑒定結果表明，該辦公樓評為Csu級，即建筑物的安全性不符合《民用建筑可靠性鑒定標準》GB 50292-1999對Asu級的要求，顯著影響整體承載，應采取措施，且可能有少數構件必須立即采取措施。
（二）、該辦公樓地基下沉、墻體裂縫的主要原因是地基土浸水濕陷所致，次要原因是河道開挖、抽水等會引起場地軟弱下臥層的變形。其浸水水源主要為辦公樓東側為新修公路雨水、場地地面水沿地面裂縫滲入。
（三）、該辦公樓場地地面塌陷、護坡、圍墻出現裂縫的主要原因則是河道開挖、抽水等施工引起場地軟弱下臥層的變形所致；次要原因是辦公樓東側新修公路的雨水、場地地面水沿地面裂縫滲入等。
（四）、建議對該樓所有管溝、管道進行檢查維修，對散水、室外地坪裂縫、混凝土伸縮縫進行處理，并做好房屋四周地面的豎向排水，嚴禁水再次浸入地基。立即對辦公樓前的人行道進行硬化處理，保證排水通暢。
（一）測量過程簡述
（1）測量依據：JJG 700—1999《氣相色譜儀檢定規程》。
（2）測量環境條件：溫度（15～25）℃，相對濕度40％～68％。
（3）測量標準：江蘇省計量科學研究院提供的標準物質。具體為氮中甲烷標準氣體。
（4）被量對象：氣相色譜儀。
（5）測量方法：氣相色譜儀（以下簡稱儀器）是在規定了儀器載氣流速穩定性、柱箱溫度穩定性、程序升溫穩定性的情況下，用微量注射器注入一定體積的標準物質，利用試樣中各組分在色譜柱中的氣相和固定相間的分配及吸附系數不同，由載氣把氣體試樣或汽化后的試樣帶入色譜柱中進行分離，并通過檢測器進行檢測的儀器。根據各組分的保留時間和響應值進行定性/定量分析。
（6）評定結果的使用：在符合上述條件下的測量結果，一般可參照使用本不確定度的評定方法。
（二）數學模型
火焰離子化檢測器（FID）
＝ (2)
式中：FID的檢測限（g/s）；
基線噪聲，（mV）；
標準物質的進樣量，（g）；
標準物質中溶質的峰面積，（mV·s）；
（三）各輸入量的標準不確定度分量的評定
對某臺氣相色譜儀檢測器為TCD的儀器，在室溫（25±1）℃的環境下進行檢定。
1標準物質的相對標準不確定度的評定
氮中甲烷標準氣體相對不確定度通常由標準物質證書給出，其定值不確定度為1.5％，包含因子＝2，則：
＝0.015/2＝0.0075
2微量注射器校準值的相對標準不確定度的評定
微量注射器的體積刻度是重要的不確定度來源之一，所以，微量注射器必須經校準后才能使用。根據上級校準證書中給出的測量不確定度為0.5%，k=2,則
＝0.005/2＝0.0025
3 峰面積測量值的相對標準不確定度的評定
峰面積或峰高測量不確定度主要為進樣的進樣的重復性，規程規定進樣6次,定量重復性為不大于3%，則：
＝0.03/＝0.0122
4基線噪聲測量的相對標準不確定度的評定
對于工作站而言，基線噪聲引起的一般為0.01。
（四）合成標準不確定度及擴展不確定度的評定
1靈敏系數
數學模型： ＝
靈敏系數： ＝1 ＝1＝－1
2各不確定度分量匯總及計算表
各不確定度分量匯總及計算表
5擴展不確定度的評定
[關鍵詞]果蠅S2細胞；熒光素酶；啟動子；報告基因；轉染
在研究基因功能的過程中，不可避免地要研究基因的調控機制，而基因的表達產物復雜且難以對其定量和定性，要在細胞生長周期的任意點了解細胞的基因表達產物更是非常困難。但報告基因分析系統的發現給基因調控與表達的研究帶來了新的希望。近年來，報告基因系統的研究取得了快速的發展。報告基因是一種編碼某種易于檢測蛋白質或酶的基因，通過它的表達產物來標定目的基因的表達調控，因此，對真核基因調控的了解可以不通過直接測定調控元件調節轉錄速率的能力，而是把順式調控元件與報告基因的序列連接起來，在基因轉錄的過程中測定報告基因轉錄產物的表達量，從而判斷相應的順式作用元件的調控能力。作為報告基因必須具備以下特點：（1）由原核基因編碼的基因產物必須區別于轉染前真核細胞內任何相似的產物；（2）細胞內其他基因產物不會干擾報告基因產物的檢測；（3）報告基因編碼產物的檢測應該快速、簡便、靈敏度高、重復性好。該技術的主要優點是靈敏度高、可信性大及檢測方便且適合大規模檢測，目前已廣泛應用于啟動子分析、監控轉基因及其表達、細胞的信號轉導與藥物的篩選等多種細胞事件[13]。熒光素酶（LUC）報告基因來源于北美螢火蟲，能催化螢火蟲的氧化性羧化作用，同時發射出光子，可被光度計捕獲定量。LUC的分析具有快速、方便、線性較好等優點，正成為最廣泛使用的報告基因。pGL3系列的質粒就是帶有LUC報告基因的質粒載體，我們可以利用這一系列的工具載體研究果蠅中基因的表達調控方式，其中pGL3Control帶有SV40的啟動子和增強子。SV40是一種猴病毒， 它的增強子/啟動子區域可使其在大多數細胞株中有高度的組成性表達，因而廣泛用于構建真核基因的表達載體，因此pGL3Control可作為檢測體系中的陽性對照。但由于SV40啟動子在果蠅S2細胞中不表達，所以我們將果蠅actin 5C 蛋白的啟動子（pac）[4]構建到質粒pGL3Basic中，得到了高表達LUC的重組載體pGL3pac。這一質粒的構建可為研究果蠅中基因的調控方式奠定基礎，同時也可為研究其他報告基因在不同細胞中的表達提供借鑒作用。
1 材料和方法
1.1 菌株、質粒及試劑大腸桿菌DH5α（作者所在實驗室保存），質粒pGL3Basic(Promega公司)，pAc5.1/V5His/LacZ(Invitrogen公司)，限制性內切酶XhoⅠ、HindⅢ及T4連接酶、DNA聚合酶(TaKaRa公司)，小量膠回收試劑盒(TaKaRa公司)，中量質粒抽提試劑盒(Invitrogen公司)，LUC檢測試劑盒(Promega公司)，S2細胞Schneider培養基(Invitrogen公司)，胎牛血清（Gibco公司）。
12 方法
1.2.1 pac啟動子的獲得 以pAc5.1/V5His/LacZ質粒為模板進行PCR擴增。上游引物5′GCGCCTCGAGCTTCAAGGAATTAATTCTATATTCT3′，下游引物5′GCGCAAGCTTGGTCTCTGGATTAGACGACT3′（劃線部分分別為XhoⅠ和HindⅢ酶切位點）。PCR反應參數為：95 ℃ 5 min；94 ℃ 1 min，60 ℃ 1 min，72 ℃ 2 min，共30個循環； 72 ℃延伸10 min。
1.2.2 重組質粒的構建鑒定與中量抽提純化 PCR產物分別經XhoⅠ、HindⅢ雙酶切后進行瓊脂糖凝膠電泳，割膠回收酶切片段，與同樣經酶切、割膠回收的pGL3Basic質粒于16 ℃連接過夜，連接產物轉化大腸桿菌DH5α，并涂布于含氨芐青霉素（終質量濃度為50 mg?L-1）的固體培養基上，37 ℃過夜培養。挑陽性克隆提取質粒，酶切和測序鑒定，鑒定正確的質粒經中量質粒抽提試劑盒提取純化。
1.2.3 S2細胞培養及瞬時轉染 S2細胞由本實驗室凍存，使用Schneider培養基，補以10%胎牛血清。S2細胞培養在28 ℃無CO2培養箱中，根據其生長狀態，按一定比例每3 d傳代1次。待細胞生長狀態良好時進行瞬時轉染分析。轉染時在12孔板中接種1×106個細胞，加入1 ml含10%胎牛血清的Schneider培養基，置28 ℃無CO2培養箱中培養6～16 h[細胞生長至對數生長期達（2～4）×106ml-1]，在1.5 ml Eppendorf 管中準備以下試劑：溶液A，12 μl 2 mol?L-1 CaCl2，5 μg重組質粒，1 μg pAcLacZ質粒，加入雙蒸水至總體積為100 μl，混勻待用；溶液B，100 μl2×HBS。將A溶液緩慢加入B溶液中，輕輕混勻，室溫放置30 min，以形成Ca3PO4DNA復合物。將Ca3PO4DNA復合物逐滴加至細胞上，混勻后置28 ℃無CO2培養箱中繼續培養，24 h后用含10%胎牛血清的Schneider培養基給細胞換液。細胞轉染48 h后裂解細胞，先吸去培養液，用PBS洗2遍，在每個培養孔中加入200 μl Reporter lysis buffer，保證充分覆蓋細胞，凍融1次以確保細胞裂解，將細胞裂解液移至1.5 ml Eppendorf管中，振蕩10～15 s，離心（12 000×g，2 min，4 ℃），轉移上清于新管。制備好的細胞裂解液可用于測定或貯存于-70 ℃備用。
1.2.4 LUC和β半乳糖苷酶(βgal)活性測定 取制備好的細胞裂解液進行LUC和βgal活性的測定。LUC活性測定前取20 μl平衡至室溫的細胞裂解液，加入80 μl LUC底物，迅速混勻，置光度計中，記錄讀數。βgal活性測定根據分子克隆的方法，在每個用于測定轉染細胞裂解物的Eppendorf管中加入100×Mg2+ 3 μl、1×ONPG 66 μl、細胞裂解物30 μl、0.1 mol?L-1Na3PO4 201 μl，混勻。置37 ℃保溫30 min，以500 μl 1 mol?L-1 Na2CO3終止顯色反應。置酶標儀上，在波長420 nm處讀光吸收值來表示βgal的活性，以共轉化的βgal活性作為內源對照，以/βgal活性的值為系數，比較各組在轉化效率相同時LUC活性的相互關系。以沒有任何插入片段時pGL3Basic的LUC活性為1，比較加上插入片段pac啟動子后的LUC活性增加的倍數，即LUC的相對活性，以反映LUC基因表達的相對水平。
2 結
果
2.1 重組載體的構建鑒定與純化以pAc5.1/V5His/LacZ質粒為模板，通過上游引物和下游引物PCR擴增獲得pac啟動子2 500 bp基因片段（圖1），用XhoⅠ、HindⅢ雙酶切后克隆到載體pGL3Basic中（圖2）。提取重組陽性質粒，XhoⅠ、HindⅢ雙酶切后得到2 500 bp的基因片段（圖1）。經測序鑒定，閱讀框架不變。鑒定完成的重組質粒經過質粒中量抽提試劑盒提取純化，得到符合轉染所需的高純度高濃度的重組質粒pGL3pac，經測定其260 nm的OD值，計算得到其濃度為0.99 μg?μl-1，A260 nm/A280 nm為1.81。
2.2 S2細胞的瞬時轉染分析轉染結果顯示，pGL3Basic和pGL3Control中LUC的相對活性無明顯差異，提示SV40啟動子在果蠅S2細胞中不表達或低表達。而pGL3pac中插入了pac啟動子，LUC的相對活性明顯增高。pGL3pac在果蠅S2細胞中LUC的活性是pGL3Basic LUC活性的近2.7萬倍。見表1。表1 瞬時轉染后各組分酶活性值
3 討
論
LUC是現在常用的一種報告基因，因其無放射性、檢測快、靈敏度高、半衰期短、線性好等特點而得到廣泛的應用。我們構建了pGL3pac這一重組質粒，使得在果蠅S2細胞中能夠高表達LUC，為進一步的實驗提供了一個好的工具。首先，它可作為基因啟動子分析研究中的陽性對照，通過與該重組質粒的轉染結果比較，從而判定不同順式作用元件對轉錄的影響。其次，我們可以將目的基因某一區域的啟動子元件插入到重組質粒pGL3pac啟動子的上游或下游，通過LUC表達量改變的放大作用，進一步分析這些啟動子元件的生物學作用，找到在轉錄過程中起到關鍵作用的核心啟動子序列。在此基礎上，我們還可以了解特定的反式作用因子對基因表達的影響。再次，還可以將目的基因自身的5′端或3′端的UTR序列插入到LUC基因的上下游，通過檢測LUC的水平，為翻譯水平的調控提供依據。在實驗過程中，有很多方面值得我們注意。第一，在重組質粒利用中量試劑盒抽提純化時，想得到濃度高的產物，應注意在菌液的培養量和培養時間上進行調整。因實際環境的不同，按照操作說明所示的條件往往難以得到足夠的質粒量，通過增加培養的菌液量和延長培養時間可取得很好的效果。由于所得的質粒是細胞轉染所需，故在抽提純化時應特別強調無菌的原則。第二，在轉染實驗中，重組質粒pGL3pac必須共同轉染表達另外一帶有報告基因的質粒以衡量轉染效率。我們選擇了pAcLacZ，該質粒含lacZ基因，能夠表達βgal，利用βgal水解底物ONPG的能力計算出βgal的活性，以此作為內源對照衡量不同組分的轉染效率。這個質粒與目的質粒的轉染比例對于結果有很大的影響。因βgal的活性在0.2～0.8之間符合線性范圍，所以可根據這一要求摸索合適的轉染比例，通過實驗可得出兩者在5∶1濃度比時較合適。另外，還可以選擇帶有其它報告基因的質粒載體，如phRL是一種帶有海腎熒光素酶（RLUC）報告基因的質粒載體，如果選擇phRL作為共轉質粒則可通過在一管細胞裂解液中先后加入不同的底物，用同種儀器測定酶的活性即可，因其測定的兩種酶的活性在同一數量級而且減少實驗步驟，使實驗數據更加可靠，實驗過程更加簡便[5]。第三，我們是通過瞬時轉染得出結論，為排除一些因素的影響，轉染實驗必須重復3或4次，本實驗的轉染數據即是3次實驗的平均值。在實驗中我們選擇了pac替代pGL3Control中的SV40啟動子，主要是因為果蠅actin 5C蛋白組在果蠅體內為組成性表達且不需誘導，因此，利用pac作為替換啟動子，不僅能產生較好的效果而且可簡化實驗操作。這一質粒的構建不僅為我們在細胞水平利用報告基因系統研究果蠅中基因的表達調控方式提供工具載體，而且它的構建方法提示我們可通過相同的途徑構建適合轉染不同類型細胞的帶有報告基因的質粒載體，作為相應研究的基礎。
[參考文獻]
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圖1
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圖2
圖3
小提示：“百寶箱”的寶貝件件數
“百寶箱”的實用功能還很多，比如特殊選定、快速為工作表建立鏈接目錄、批量添加上下標（加解密、個性批注、導入圖片和隱藏）、查看磁盤剩余空間、合并居中還原、設置與取消允許編輯區、一鍵修復（減肥、簡繁轉換、刪除超鏈接、刪除選區批注、生成字母序列）、清除代碼注釋行、生成2003樣式菜單、身份證信息函數等。
大學即將畢業我們都會經歷一個過程，那就是實習，參加實習工作的目的是為了把知識融會貫通提升自己的能力。下面是小編為大家整理的建筑測量頂崗實習報告范文的內容，希望能夠幫助大家，歡迎閱讀！
建筑測量頂崗實習報告一
秋風送爽，歲月流金，轉眼又到一年開學時，我們_屆的學生已經成為學長學姐了，開學的第三四周學校安排了我們班測量實習。現在為期兩周的測量實習結束了，雖然實習只有短短的兩周時間，準確的說只有十來天的時間，但是我們在這兩周也就是十幾天的實習過程中，學到了很多的東西，我們二小組成員的每一個人都收獲很大。以下就是我對本次實習的一些心得：
實習使我們鞏固了以前課堂上所學到的知識并且對以前的零碎的測量知識有了綜合應用的機會。使我們對控制測量和地形圖測繪過程的整體有了良好的了解及怎樣放樣也有了一定的掌握，對儀器的操作也更加嫻熟了。
這次的實習使我收獲了很多，比如我通過實習能更熟練的使用水準儀、經緯儀等測量儀器與工具，并能快速的架好儀器進行測量工作；較好的掌握了導線控制測量、地形圖測繪的基本方法，很好的鞏固了理論教學知識，提高了實際操作的技能。原先老師在課堂上講解的測量知識也在實踐中得到應用，并發揮了重要的作用，從而相互對照，將我的測量知識和測量水平提高了不少，同時在這實習中讓我再次認識到實習的團隊精神的重要性：每人的一個粗心，一個大意，都可能直接使我們一個上午的工作甚至一天的工作都白費，如果我們都畢業了在工作單位還是這樣的大意，這樣會直接影響工程的進度，甚至是帶來一生都無發彌補的損失。
一次測量實習要完整的做完，但靠一個人的力量和構思是遠遠不夠的，只有小組的合作和團結才能讓實習快速而高效的完成，這次測量實習培養了我們小組的分工協作能力，增進了大家感情。雖然有的時候我們會因為一些實習中的自己的想法和大家吵的耳紅面赤，但是大家最終的想法還是一致的，都是想把這次實習完成的更加完美。
我們小組成員在實習中的都付出了努力，最后很好的完成了這次的實習！
實習開始的第一天，我們先去了教室集中，聽了我們測量指導老師的講解，實習的小組人員安排，實習中的一些要注意的事項以及兩周的實習任務安排，讓我們大致的了解了實習安排和實習任務！隨后由于實驗樓儀器保管老師不在，暫時拿不到儀器，要第二天才能拿到儀器。指導老師只能叫我們幾個組的成員先去踏勘選點。我們二組也聽從了老師的安排，花了一個下午的時間去勘定了12個選點。
我們小組勘定了我們小組要勘的點后，大家就一起商量了一下明天我們測量的一些細節。
第二天上午可以領儀器了，我組在儀器室領了儀器之后，來到我們昨天勘定的一號點準備開始我們的第一天的實習了！
這天的上午，我們領來儀器后并沒有很快的開始測量，我們而是先對儀器進行了檢查以及熟悉了下儀器，對儀器各個部件及功能又進行進一步的認識，每個人都試著自己獨立完成架儀器的操作。我們是用經緯儀用測回法進行測量。
下午我們正式開始了測量實習，今天的任務是完成我們測區范圍內各個內角的測量。通過上午對儀器的熟悉，我們很快的在各個點架好儀器進行測角工作。測量過程中，并沒有一帆風順，我們遇到了一些問題，使我們測出來的角度有偏差。我們并沒有放棄，第一次的測量出現了這個問題，我們小組成員進行了討論，分析了出現問題的原因，之后我們又在各個點重新架好儀器，這次我們很細心的測量并很好的完成了測角的工作。五點多了，我們才完成了今天的測角工作。
第一天的測量不是很順利，中間出現的問題是我們在測量工作中不注意就常常會發生的，這個小小的問題使我們第一次的測量結果出現錯誤。這次的問題也讓我們認識到在進行測量工作時一定要細心，認真仔細的去做！
測量實習的第二天，我們是進行了各控制點的間距的測量，借鑒第一天的測量工作中出現的問題，我們今天打起十分的精神，認真細心的去做，一次就很準確的完成了控制點的間距的測量！我們小組的每個人都感到十分欣慰，這是一種進步。
第三天外面下著雨，我們沒辦法進行測量工作，我們在寢室回顧了兩天的測量時的一些細節，出現的問題。并翻出書本把一些遺忘的知識進行了回顧！還一起探討了接下去的工作怎么進行！
第四天我們進行了各控制點之間的夾角的測量，我的工作就是把其他成員的測量出來的數據記錄在紙上。測量過程中每個人都很積極的做各自分配到的工作。
他們把測出的數據記錄下來，我按照數據進行地形圖的繪制，一開始還真不知道如何把它繪制好，繪制的時候總是出現各種各樣的問題。之后測量指導老師給我們講解了繪圖的的方法以及測量的人應該注意的事項。
在老師的指導下我明白了繪制的方法及一些注意點，我按照指導老師教的方法進行繪制，這次繪制出來的比一開始要好了很多，我很快的就熟悉了繪制地形圖，他們測一組數據，我馬上就將這組數據繪制到圖上，有時們的數據我在圖上繪制時發現不對了，就對現場進行查看，分析是我繪圖出現了問題還是他們測量出現了問題。當發現我繪圖時并沒有出現什么問題，我就把他們測出的數據出現的問題向他們指出，他們便很快的進行了對出現問題的點進行重新的測量！又有時我不能明白他們測的數據對應的點時，他們就對我細心的指點，我繪圖出現了問題，他們也能很好的指出了。
接下來的幾天都是測繪地形圖，在大家的努力下我們比預計的時間提前了一天完成。
很快的我們就開始了繪圖，我們先在圖上設計了十二個控制點，代表我們要在圖紙上需要的畫圖范圍，這樣才能在圖紙上繪出其他需要標注的各個建筑物。
我們先是用老師選定的幾個基礎點，然后推算出了其他的十二個點的坐標，和各點到已知點的距離，和各點的方位角。這些東西搞完了過后才能根據我們測出的數據以及算出來的東西畫出我們需要的圖紙。所以我覺得繪圖是整個測量實習過程中最傷腦筋的一環，曾不止一次令我們頭痛。
在這次實習中，我們學到了測量的實際能力，更有面對困難的忍耐力，同時也認識到小組團結的重要性以及測量的步驟。首先，是熟悉了經緯儀用途及使用方法，掌握了儀器的檢驗和校正的方法，其次，在對數據的檢查和校正的過程中，明白了各種測量誤差的來源，其主要有三方面：儀器誤差、外界影響誤差、觀測誤差。了解如何避免測量結果誤差，最大限度的就是減少誤差的出現，即要做到：
1、提高自身的測量水平，降低誤差。
2、科學處理數據的數學方法如：多次測量取平均數等來減少誤差。
除此之外，還應掌握一套科學的測量方法，如：我們在控制點花費過多的時間，必須尋找科學的方法縮短測量時間，在有限的儀器情況下我們選擇距離交匯法（皮尺），角度交匯法（經緯儀），分兩組測量縮短時間。在測量中還要遵循一定的測量原則，如“從整體帶局部”、“先控制后碎步”的工作原則，并做到步步有檢核。這樣做不但可以防止誤差的積累，及時發現錯誤，更可以提高測量的效率。通過工程實踐，學會了地形圖的繪制和碎步的測量等課堂上無法做到的東西，很大程度上提高了動手和動腦的能力，同時也拓展了與同學的交際合作能力。一次測量實習要完整的做完，單靠一個人的力量和構思是遠遠不夠的，如我們在碎步測量時分兩組測量使我們測量工作大幅提速，只有我們本小組各成員的合作和團結才能讓實習快速而高效的完成。
這次實習，我們學到很多的東西。讓我更好的掌握了測量的基本功和測量的一些要素，同時也促進了與同學間的交往，使我懂得了團結互助的重要性以及儀器使用的正確方法
這次實習我想最大成功之處就是我們小組的團對合作精神。因為任何一項小的工作一個人都不能完成，必須有大伙的同力合作才能順利完成工作。應該說，沒有團隊就沒有我們今天的比較完美的實習結果。
經過兩周的測量實習以及測量后數據處理，本次實習順利結束。在這短短的兩周里，我們在測量過程中遇到了不少的困難，我們也克服了不少的困難，解決了一些困擾已久的問題。所以這兩周是緊張而又充實的兩周。
建筑工程專業的測量是一項實踐性比較強的工作。通過這次測量我在發現我是一個建筑工程專業的學生。測量也是一項務實求真的工作，來不得半點馬虎，我們在測量實習中必須保持數據的原始性，這也是很重要的一點。為了確保計算的正確性可有效性，我們得反復校對各個測點的數據是否正確。我們在測量中不可避免地犯下一些錯誤，比如讀數時估讀不夠準確，水準尺或花桿放得不垂直就讀數，讀數時間間隔過長，等等，都會引起一些誤差，因此，我們在測量中內業計算要和測量同時進行，這樣就可以及時發現錯誤，及時糾正錯誤，也避免了很多不必要的麻煩，節省時間，提高工作效率。由于這是一項歷史性工作，很多數據在以后都可能用到，我們就要力種樹各個數據的有效性，保留原始數據也利于以后的查證，這也體現了務實求真的精神，不僅在這次實驗中，在以后的工作和生活中，我們也應該做到這一點。
這次的實習也是一次培養我們獨立思考、工作能力的一次機會，在測量過程中，我們都要去想一想如何地去設點，怎樣去測量，要測哪一些數據，如何才能夠確保所測的數據有效性，然后一起討論解決。我們都沒有很豐富的經驗，也沒有測繪的天才，這就是要啟發我們個人的主觀能動性，發揮個人的聰明才智，自己給自己一次發揮的機會。
建筑測量頂崗實習報告二
自20xx年_月_日起，我們進行了為期14天的工程測量實習。
這次實習的內容是對工程測量知識的實踐化，實習的要求是讓每個同學都對工程測量的實際操作能夠達到基本掌握的程度。這次實習與以前的課堂實習相比，時間更加集中、內容更加廣泛、程序更加系統，完全從控制測量生產實際出發，加深對書本知識的進一步理解、掌握與綜合應用，是培養我們理論聯系實際、獨立工作能力、綜合分析問題和解決問題的能力、組織管理能力等方面素質。也是一次具體的、生動的、全面的技術實踐活動。
在實習的第一天，由_x老師給我們做了實習的動員。在動員會上，x老師強調了本次實習的重要性，并分析了水電校地理條件較復雜及建筑物密集等因素給本次實習帶來的困難。并鼓勵同學們努力克服困難，努力完成本次實習。還講解了儀器操作、搬遷中的注意事項，并要求在實習期間自行保管實習備品。本次實習中需要用到的儀器主要有水準儀、水準尺、腳架、經緯儀。當天我們就正式開始了室外的測量工作。
一、實習目的
1、鞏固課堂教學知識，加深對控制測量學的基本理論的理解，能夠用有關理論指導作業實踐，做到理論與實踐相統一，提高分析問題、解決問題的能力，從而對控制測量學的基本內容得到一次實際應用，使所學知識進一步鞏固、深化。
2、通過實習，熟悉并掌握三、四等控制測量的作業程序及施測方法。
3、掌握用測量平差理論處理控制測量成果的基本技能。
4、通過完成控制測量實際任務的鍛煉，提高獨立從事測繪工作的計劃、組織與管理能力，培養良好的咱也品質和職業道德。
5、熟悉水準儀、經緯儀、全站儀的工作原理。
二、實習心得
為期兩個星期的工程測量學習已經結束了，通過這次實習，讓我深刻明白了理論聯系實際的重要性。測區是我們重慶市永川區水利電力職業技術學院校區，雖然測區比較大，基本上是整個學校，測繪圖也是我們整個學校的平面圖，為了能盡快地完成任務，我們小組星期六、星期天加班進行測量，我們在測量的過程中也并不感到累，也沒有感到辛苦，反而還能自得其樂。
測量學首先是一項精確的工作，通過在學校期間在課堂上對測量學的學習，使我在腦海中形成了一個基本的、理論的測量學輪廓，而實習的目的，就是要將這些理論與實際工程聯系起來。測量學是研究地球的形狀和大小以及地面點位的科學，從本質上講，測量學主要完成的任務就是確定地面目標在三維空間的位置以及隨時間的變化。在信息社會里，測量學的作用日益重要，測量成果做為地球信息系統的基礎，提供了最基本的空間位置信息。構建信息高速公路、基礎地理信息系統及各種專題的和專業的地理信息系統，均迫切要求建立具有統一標準，可共享的測量數據庫和測量成果信息系統。因此測量成為獲取和更新基礎地理信息最可靠，最準確的手段。測量學的分類有很多種，如普通測量學、大地測量學、攝影測量學、工程測量學。作為建筑工程系的學生，我們要學習測量的各個方面。測繪學基礎就是這些專業知識的基礎。
通過這次實習，學到了測量的實際能力，更有面對困難的忍耐力；也學到了小組之間的團結、默契，更鍛煉了自己很多測繪的能力。首先，是熟悉了水準儀、經緯儀的用途，熟練了水準儀、經緯儀的各種使用方法，掌握了儀器的檢驗和校正方法。其次，在對數據的檢查和矯正的過程中，明白了各種測量誤差的來源，其主要有三個方面：儀器誤差（儀器本身所決定，屬客觀誤差來源）、觀測誤差（由于人員的技術水平而造成，屬于主觀誤差來源）、外界影響誤差（受到如溫度、大氣折射等外界因素的影響而這些因素又時時處于變動中而難以控制，屬于可變動誤差來源）。了解了如何避免測量結果錯誤，最大限度的減少測量誤差的方法，即要作到：
（1）在儀器選擇上要選擇精度較高的合適儀器。
（2）提高自身的測量水平，降低誤差水平。
（3）通過各種處理數據的數學方法如：距離測量中的溫度改正、尺長改正，多次測量取平均值等來減少誤差。
第三，除了熟悉了儀器的使用和明白了誤差的來源和減少措施，還應掌握一套科學的測量方法，在測量中要遵循一定的測量原則，如：“從整體到局部”、“先控制后碎部”、“由高級到低級”的工作原則，并做到“步步有檢核”。這樣做不但可以防止誤差的積累，及時發現錯誤，更可以提高測量的效率。通過實踐，真正學到了很多實實在在的東西，比如對測量儀器的操作、整平更加熟練，學會了數字化地形圖的繪制和碎部的測量等課堂上無法做到的東西，很大程度上提高了動手和動腦的能力。
我們在這次的實習中，也了解到了要想很好地進行測量，首先必須要掌握過硬的基本理論知識，要有實干精神，每個組員都必須親自實踐，而且要分工明確，工作也可以交換來做，還需要知道失敗乃成功之母，在實習測量的過程中，不可能完全的沒有錯誤，我們應該不氣餒，繼續一次又一次的重測，重計算，一次次地練習，一次次得提高測量水平，我們不斷在經驗中獲得教訓。而且也多虧了老師的指導，我們實習之初，遇到了各種各樣的困難，多虧的老師的耐心講解，才使我們解決了不少測量中的難題。
我們在實習過程中，不可避免的遇到了一些困難，在我們實現之初，我還有點擔心自己不會測，測不好，擔心只有兩個星期的測量時間，自己不能按時的完成任務，但是，經過我們小組的反復測量，我們的團結、默契，克服了測量中的種種問題，終于按時完成了任務。在測量實習的過程中，我們也遇到了各種各樣的困難。比如：
（1）立標尺時，標尺除立直外，還要選在重要的地方。因此，選點就非常重要，點一定要選在有代表性的地方，同時要注意并非點越多越好，相反選取的無用點過多不但會增加測量，計算和繪圖的勞動量和多費時間，而且會因點多而雜亂產生較大的誤差。
（2）在用水準儀和經緯儀測量的過程當中，有的過程出現了大的誤差，經過我們的重新測量計算，誤差范圍也減小到了可以允許的范圍里。
（3）還有就是計算問題，計算必須由兩個人完成，一個初步的計算，一個檢驗，不過，在此過程當中，也還是出現了計算錯誤的問題，我們在不斷的重復檢驗之中算出了正確的數值，盡量讓誤差減少到了最少
通過實際的測量實習，讓我學到了很多實實在在的東西，比如對儀器的操作更加熟練，學會了地形圖的繪制和碎部的測量等課堂上無法做到的東西，很大程度上提高了動手和動腦的能力，同時也拓展了與同學的交際、合作的能力。一次測量實習要完整的做完，單單靠一個人的力量和構思是遠遠不夠的，只有小組的合作和團結才能讓實習快速而高效的完成。
建筑測量頂崗實習報告三
一、前言
這次實習的內容是對工程測量知識的實踐，實習的要求是讓每個同學都對工程測量的實際操作能夠達到基本掌握的程度。這次實習與以前的課堂實習相比，時間更加集中、內容更加廣泛、程序更加系統，完全從控制測量生產實際出發，加深對書本知識的進一步理解、掌握與綜合應用，是培養我們理論聯系實際、獨立工作能力、綜合分析問題和解決問題的能力、組織管理能力等方面素質。也是一次具體的、生動的、全面的技術實踐活動。
二、實習目的
鞏固課堂教學知識，加深對控制測量學的基本理論的理解，能夠用有關理論指導作業實踐，做到理論與實踐相統一，提高分析問題、解決問題的能力，從而對控制測量學的基本內容得到一次實際應用，使所學知識進一步鞏固、深化。同時，熟悉水準儀、經緯儀、全站儀的工作原理。
三、實習心得
為期兩個星期的工程測量學習已經結束了，通過這次實習，讓我深刻明白了理論聯系實際的重要性。測區是我們_學校，雖然測區比較大，基本上是整個學校，測繪圖也是我們整個學校的平面圖，為了能盡快地完成任務，我們小組星期六、星期天加班進行測量，我們在測量的過程中也并不感到累，也沒有感到辛苦，反而還能自得其樂，同時也讓我感嘆良多。
首先，測量學是一項精確的工作，通過在學校期間在課堂上對測量學的學習，使我在腦海中形成了一個基本的、理論的測量學輪廓，而實習的目的，就是要將這些理論與實際工程聯系起來。測量學是研究地球的形狀和大小以及地面點位的科學，從本質上講，測量學主要完成的任務就是確定地面目標在三維空間的位置以及隨時間的變化。在信息社會里，測量學的作用日益重要，測量成果做為地球信息系統的基礎，提供了最基本的空間位置信息。構建信息高速公路、基礎地理信息系統及各種專題的和專業的地理信息系統，均迫切要求建立具有統一標準，可共享的測量數據庫和測量成果信息系統。因此測量成為獲取和更新基礎地理信息最可靠，最準確的手段。測量學的分類有很多種，如普通測量學、大地測量學、攝影測量學、工程測量學。作為建筑工程系的學生，我們要學習測量的各個方面。測繪學基礎就是這些專業知識的基礎。
方法 采用全自動生化儀定量檢測22 929例住院及門診患者的全血標本G6PD，分析比較不同性別、民族和年齡者的檢測結果。結果 G6PD總缺乏率為8.02%，其中男性缺乏率為9.49%，女性缺乏率為6.19%，男性缺乏率顯著高于女性（P＜0.01）。漢族缺乏率為7.68%，壯族為9.08%，瑤族為11.05%，三種民族的缺乏率比較差異有統計學意義（P＜0.01），其中少數民族的缺乏率顯著高于漢族（P＜0.01）。0～18歲缺乏率為10.11%，19～45歲為6.58%，46～82歲為7.04%，不同年齡組的缺乏率比較差異有統計學意義（P＜0.01），其中0～18歲的年齡段缺乏率最高（P＜0.01）。結論 G6PD缺乏癥在本地區有較高的發病率，并且存在性別、民族和年齡上的差異，重視對住院病人和門診就診者的G6PD檢測，對指導對癥治療用藥、優生優育，提高人口素質等均具有重要的意義。
【關鍵詞】 葡萄糖-6-磷酸脫氫酶；全血
文章編號：1003-1383(2012)04-0530-02
中圖分類號：R 555 文獻標識碼：A
doi:10.3969/j.issn.1003-1383.2012.04.033
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（glucose 6-phosphate dehidrogenase,G6PD）缺乏癥在全世界累及1億人以上，我國發生率約為0.2%～15.7%，尤以南方各省較高［1］。為了解本縣轄區內人群G6PD缺乏發生率，我們收集在我院門診就診和住院病人的血標本，進行G6PD活性定量檢測，現將結果報告如下。
對象與方法
1.對象 2010年11月～2011年9月我院住院和門診就診患者的全血標本22 929例，其中男性12 694例，女性10 235例。有漢族、壯族和瑤族，漢族18 343例占80.0%，壯族3 898例占17.0%，瑤族688例占3.0%。年齡0～82歲，其中0～18歲7 960例，19～45歲4 302例，46～82歲10 667例，農村和城鎮分別為14 904例和8 025例。
2.儀器和試劑 儀器：日本羅氏Modular P800模塊，試劑：長春匯力生物技術有限公司提供的G6PD定量試劑盒。用EDTA.K2抗凝管抽取靜脈血，新生兒可采用臍帶血。
3.方法 標本按操作說明書處理，經溶血后用定量法上機檢測，各步操作均嚴格按照試劑和儀器說明書進行，并執行每天室內質控。標本送檢后于當天檢測，不能當天檢測的置2～8℃冰箱保存次日檢測。正常參考值范圍：成人638～1980 U/L，臍帶血：832～2460 U/L。低于參考值下限為缺乏。
4.觀察項目 分析比較不同性別、民族和年齡者的檢測結果。
5.統計學方法 采用SPSS 16.0統計軟件處理數據。計數資料以百分率表示，組間比較用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。
結 果
1.不同性別的檢測結果比較 22 929例全血標本G6PD酶活性測定總缺乏率為8.02%，其中男性缺乏率為9.49%，女性缺乏率為6.19%，男性缺乏率顯著高于女性（P＜0.01）。見表1。
2.不同民族的檢測結果比較 漢族缺乏率為7.68%，壯族為9.08%，瑤族為11.05%，三種民族的缺乏率比較差異有統計學意義（P＜0.01），其中少數民族的缺乏率顯著高于漢族
（P＜0.01）。見表2。
3.不同年齡段的檢測結果比較 0～18歲缺乏率為10.11%，19～45歲為6.58%，46～82歲為7.04%，不同年齡組的缺乏率比較差異有統計學意義（P＜0.01），其中0～18歲年齡段的缺乏率最高（P＜0.01）。見表3。
討 論
G6PD缺乏癥為伴性不完全顯性遺傳病，是世界上最常見的酶缺乏癥，突變基因定位于X染色體上，男性為一條X和一條Y染色體，為半合子，酶活性顯著降低，可以發病。其缺陷基因來自母親，并傳給女兒，她們均為雜合子，能產生足夠量正常的G6PD酶，通常不出現任何癥狀。血中含G6PD酶活性正常和缺乏兩類紅細胞，兩者之比例決定酶活性測定的結果，其變動幅度很大，多數為中間缺乏值，少數接近正常參考值，很少數與半合子相近而可發病。女性純合子酶活性顯著降低，只有當她們的兒子出現缺陷時，才可能發現其異?；颍苌僖?。G6PD缺乏癥的發病者絕大多數為男性［1］，因此臨床上男性缺乏率高于女性缺乏率。本組資料男性缺乏率為9.49%，女性缺乏率為6.19%，男性缺乏率顯著高于女性（P＜0.01），與上述理論相符，但性別缺乏率高于文獻［2，3］報道，可能與不同地區、不同民族、不同年齡組，使用不同的檢測方法有關。
不同民族間G6PD缺乏率，漢族為7.68%，壯族為9.08%，瑤族為11.05%，三種民族的缺乏率比較差異有統計學意義（P＜0.01），其中少數民族的缺乏率顯著高于漢族（P＜0.01）。可能與當地少數民族的生活習俗，例如偏愛使用民間醫療偏方，以及各民族間的婚姻狀況和優生優育重視程度不同有關。
不同年齡組G6PD缺乏率為0～18歲10.11%，19～45歲為6.58%，46～82歲為7.04%，不同年齡組的缺乏率比較差異有統計學意義（P＜0.01），其中0～18歲的年齡段缺乏率最高（P＜0.01）?？赡芘c2003年國家取消強制婚檢后，人們對婚檢不夠重視，婚檢率明顯下降，導致出生缺陷兒明顯上升有關。46～82歲比19～45歲缺乏率稍高，但差異無統計學意義（P＞0.05），可能與取消強制婚檢前的醫療篩查水平較為穩定有關。
G6PD缺乏是一種紅細胞酶缺陷癥，引起溶血的主要原因是G6PD是一種可防止紅細胞氧化的酶，如果G6PD不足，紅細胞易受氧化損傷。當紅細胞暴露于氧化劑，其細胞結構將改變，引起細胞內的血紅蛋白沉淀（海因茲小體），造成紅細胞破裂［4］，即溶血。常見溶血類型有先天性非球形紅細胞性溶血性貧血、蠶豆病、藥物誘發溶血、感染誘發溶血和新生兒高膽紅素血癥。目前篩查方法主要有高鐵血紅蛋白還原試驗、硝基四氮唑藍試驗、Heinz小體、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶熒光斑點試驗、紅細胞葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定、分子生物學法等，前四種方法為篩選試驗，后兩種方法為確診試驗［5］。本文采用全自動生化儀檢測G6PD，能準確反映酶活性。G6PD缺乏患者，酶活性一般都降低，根據缺乏程度，缺乏程度越高，酶活性檢測值越低。G6PD缺乏癥目前尚無根治方法，一旦發病，只能對癥治療。
綜上所述，G6PD缺乏癥在本地區有較高的發病率，并且存在性別、民族和年齡上的差異，重視對住院病人和門診就診者的G6PD檢測，對指導用藥對癥治療、優生優育，提高人口素質等均具有重要的意義。
參考文獻
［1］陶元鋆.葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥［M］//血液學及血液學檢驗.北京：人民衛生出版社，1997:116-118.
［2］黃作群，唐 萍，覃桂芳，等.1 720例新生兒臍血G6PD篩查報告［J］.廣西醫學，2007，29（8）：1185-1186.
［3］姚英資，譚智偉，楊 孜，等. 深圳市龍崗區3 465例育齡人群G6PD缺乏癥篩查分析［J］.吉林醫學，2011，32（13）：2616-1617.
［4］尚 紅.醫學檢驗項目指南——幫你解析化驗結果［M］.北京：人民衛生出版社，2011:506-508.
關鍵詞：甲醛的測定 乙酰丙酮分光光度法
一、甲醛的理化性質及測定方法
1.基本的理化性質
甲醛，HCHO，為一種無色、有強烈刺激性氣味的氣體。易溶于水、醇和醚。甲醛在常溫下是氣態，通常以水溶液形式出現。易溶于水和乙醇，35～40%的甲醛水溶液叫做福爾馬林。甲醛的還原性很強，易和多種物質結合，且易于聚合。甲醛對人體的皮膚和粘膜具有刺激作用，進入人體后易于對人的中樞神經系統及視網膜造成損害。
2.標準限值
在采樣體積為0.5～10.0L時，測定范圍為0.5～800mg/m3。
3.方法介紹
甲醛氣體經水吸收后，在pH=6的乙酸一乙酸銨緩沖溶液中，與乙酰丙酮作用，在沸水浴條件下，迅速生成穩定的黃色化合物，在波長413nm處測定。
二、實驗部分
1.儀器和試劑
1.1儀器
多孔玻板吸收管、具塞比色管、水銀溫度計：0～100℃、pH酸度計、TU-1901 雙光束紫外可見光分光光度計、恒溫水浴
1.2試劑
不含有機物的蒸餾水：加少量高錳酸鉀的堿性溶液于水中再行蒸餾即得（在整個蒸餾過程中水應始終保持紅色，否則應隨時補加高錳酸鉀）。吸收液：不含有機物的重蒸餾水。乙酸銨（NH4CH3COO）。冰乙酸（CH3COOH）。乙酰丙酮（C5H8O2） 乙酰丙酮溶液：0.25%（V/V），稱25g乙酸銨，加少量水溶解，加3ml冰乙酸及0.25ml新蒸餾的乙酰丙酮，混勻再加水至100ml，調整pH=6.0，此溶液于2～5℃貯存，可穩定一個月。鹽酸（HCl）溶液、氫氧化鈉（NaOH）溶液：30g/l00m1、甲醛標準使用液：在容量瓶中將甲醛標準貯備液逐級用水稀釋成每毫升含5.0μg甲醛的標準使用溶液。2～5℃貯存，可穩定一周。純水：電阻率大于18.0MΩ·cm
2.儀器條件
波長413nm，10 mm比色皿
三、步驟
1.校準曲線的繪制
取7支25ml具塞比色管分別加入5.00μg/ml甲醛標準溶液0.0ml、0.2ml、0.8ml、2.0ml、4.0ml、6.0ml、7.0ml。于上述標準系列中，用水稀釋定容至10.0 ml刻線，加0.25%乙酰丙酮溶液2.0ml，混勻，置于沸水浴加熱3min，取出冷卻至室溫，用1cm吸收池，以水為參比，于波長413nm處測定吸光度.將上述系列標準溶液測得的吸光度A值扣除試劑空白（零濃度）的吸光度A值，便得到校準吸光度y值，以校準吸光度y為縱坐標，以甲醛含量x（μg）為橫坐標，繪制校準曲線，或用最小二乘法計算其回歸方程式。
y=bx+a 式中：a- 校準曲線截距，b-校準曲線斜率。
2.樣品測定
將吸收后的樣品溶液移入50ml或100ml容量瓶中，用水稀釋定容，取少于10ml試樣（吸取量視試樣濃度而定），于25ml比色管中，用水定容至10.0ml刻線，以下步驟按進行分光光度測定。
四、結果和討論
1.標準曲線與實樣測試
測試結果，響應值分別為0.004、0.025、0.090、0.223、0.450、0.684、0.786。計算得r=0.9999 回歸方程為Y=0.0226x-0.00303 標準曲線的相關系數滿足方法要求。
在試驗過程中，帶入國家標準編號為204517的質控樣（0.72±0.047mg/L），測定值均為0.70，相對誤差為2.78%；測試實樣，平行樣品測定值為1.71 mg/L與1.72mg/L，相對偏差為0.3%。最大相對誤差和相對偏差均符合規定要求。對于未知濃度廢水加標樣的監測，結果為4.87mg/L，加標回收率為97.4%，加標回收率不低于95%，符合實驗要求。
試驗過程中，做21個空白試驗。檢出限D=4.6σ 。計算出的最低檢出量D為0.365μg，當采樣標況體積為9L時，檢出限為0.041mg/m3。
2.現場空白和實驗室空白
現場空白吸光度測得值分別為0.005，0.004，0.004。與實驗室空白測定值（吸光度0.004）無明顯差異，符合方法要求。
3.干擾與消除
當甲醛濃度為20μg/10ml時，共存8mg苯酚（400倍），10mg乙醛（500倍），600mg銨離子（30000倍）無干擾影響。
五、結論
通過對實樣與質控樣的測定結果分析可以看出，GB/T 15516-1995《空氣質量 甲醛的測定 乙酰丙酮分光光度法》測定空氣中的甲醛，其分析結果均符合國家規定要求，因此具備使用該方法測定空氣中的甲醛含量的能力。
參考文獻
