中國首株副瘰疬分枝桿菌臨床分離株的生物學特征和毒力研究

作者:王桂榮; 劉冠; 于霞; 陳素婷; 梁倩; 尚媛媛; 鄭素華; 黃海榮 首都醫科大學附屬北京胸科醫院北京市結核病胸部腫瘤研究所國家結核病臨床實驗室北京市耐藥結核病研究重點實驗室; 101149; 首都醫科大學附屬北京胸科醫院流行病研究室; 101149

摘要:目的 對中國肺病患者體內首次分離到的1株副瘰疬分枝桿菌進行了生物學特征與毒力研究,以提高對該分枝桿菌的認識.方法 2013年對源于2007 2008年全國耐藥基線調查的140株非結核分枝桿菌(NTM),通過聯合測定16S rRNA、16S~23S rRNA間隔區(ITS)和hs筇5基因序列進行菌種鑒定,分離到1株副瘰疬分枝桿菌.通過開展一系列標準生化試驗,包括生長試驗、硝酸還原酶測定、芳基硫酸酯酶測定、碲酸鈉還原試驗、吐溫水解試驗、尿素酶試驗,以及在50 mg/ml對硝基苯甲酸(PNB)、10 mg/ml噻吩-2-羧酸肼(TCH)、5% NaCl和麥康凱瓊脂上進行生長試驗,闡明其生物學特征.通過Alamar blue微量稀釋法測定其對利福平、乙胺丁醇、異煙肼、阿米卡星、磺胺甲惡唑、氧氟沙星、對氨基水楊酸、利福噴丁、卷曲霉素、頭孢西丁、亞胺培南、米諾環素、多西環素、克拉霉素、阿奇霉素、美羅培南、甲氧芐氨嘧啶、利福布汀、利奈唑胺、鏈霉素、丙硫異煙胺、莫西沙星和左氧氟沙星共23種抗生素的藥物敏感性.為了研究副瘰疬分枝桿菌的毒力,通過尾靜脈和腹腔注射兩種途徑感染C57BL/6小鼠,在小鼠感染后的第2、4、8周取肺臟和脾臟檢測細菌載量和病理組織學變化,確定其對小鼠的致病性.結果 該株副瘰疬分枝桿菌在37℃生長旺盛,菌落光滑并呈半球形,呈黃至橘黃色.在體外對利福布丁、利福噴丁、克拉霉素、阿奇霉素、頭孢西丁和莫西沙星敏感.在C57BL/6小鼠感染后的第2周,病理組織學結果顯示小鼠肺組織出現局限性炎癥反應,表現為外周支氣管炎性滲出.在感染后的第4和第8周,肺組織表現為外周支氣管炎性滲出伴有大量炎性細胞聚集,部分組織有肉芽腫生成,但無壞死.在小鼠感染的8周時間內,肺組織和脾組織中細菌載量呈逐漸上升趨勢.結論 該副瘰疬分枝桿菌在體外對利福布汀、利福噴?

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國際結核病與肺部疾病

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