摘要:建立穩定的樹鼩(Tupaia belangeri)皮膚成纖維細胞的體外培養體系,可為有關此類細胞的實驗和疾病樹鼩細胞模型提供技術支持。取樹鼩大腿內側皮膚用組織塊貼壁法和膠原酶Ⅰ消化法分離皮膚細胞,胰蛋白酶差別消化法純化細胞;用MEM(10%FBS)完全培養基和含低血清生長添加物(LSGS)的培養基培養細胞;免疫熒光和蛋白印跡法鑒定細胞,并測定細胞的生長、凍存和復蘇特性。經樹鼩皮膚細胞分離效果比較,膠原酶消化法比組織塊貼壁法更適合用于樹鼩原代皮膚細胞分離;對分離及凍存復蘇后細胞生長狀況觀察比較發現,添加了LSGS的MEM培養基更利于細胞存活、生長;細胞形態觀察、免疫熒光和蛋白印跡檢測鑒定所分離的細胞為樹鼩皮膚成纖維細胞。成功建立了樹鼩原代皮膚細胞的分離、純化方法,并優化了該細胞的培養條件。
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